强启动子glaA介导cbhB基因在黑曲霉中的表达

被引：8

作者：

秦慧彬

杨洪江

黄文

李玲艳

机构：

[1] 工业微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院

来源：

中国生物工程杂志 | 2010年 / 30卷 / 11期

基金：

天津市自然科学基金;

关键词：

黑曲霉; 纤维二糖水解酶基因cbhB; 葡萄糖淀粉酶基因glaA; 杂合基因;

D O I：

10.13523/j.cb.20101107

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

黑曲霉纤维素酶三类不同酶系中,纤维二糖水解酶基因表达处于很低水平,导致纤维素酶总体活力水平不高。为构建黑曲霉纤维素酶高产菌株,采用基因工程方法,全基因合成拼接黑曲霉高表达葡萄糖淀粉酶基因glaA的强启动子片段与纤维二糖水解酶基因cbhB编码区片段,然后将杂合基因克隆到二元载体pCAMBIA1301上,重组质粒通过农杆菌介导转化黑曲霉分生孢子,携带杂合基因的T-DNA片段插入到黑曲霉转化子的染色体上,共筛选到48个具有潮霉素抗性的转化子。纤维素酶活力水平测定结果显示,转化子A3-9的CMC酶活力最高,为野生型黑曲霉菌株的1.31倍;转化子B1-7与A3-6的滤纸酶活力最高,为野生型黑曲霉菌株2.51倍。另外,初步分析了杂合基因在黑曲霉中的表达所需的诱导条件。

引用

页码：34 / 38

页数：5

共 10 条

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