刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析

被引：17

作者：

刘转转 ^{[1
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王海龙 ^{[1
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殷国荣 ^{[1
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马广源 ^{[1
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张建中 ^{[2
]}

凡振伟 ^{[3
]}

机构：

[1] 山西医科大学医学寄生虫学研究所、寄生虫学教研室

[2] 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所

[3] 山西医科大学第一临床医学院

来源：

中国人兽共患病学报 | 2009年 / 25卷 / 04期

关键词：

刚地弓形虫; Peroxiredoxin; 克隆; 原核表达; 免疫原性;

D O I：

暂无

中图分类号：

R382.5 [弓形体];

学科分类号：

100123 [人体微生态学];

摘要：

目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE进行鉴定,重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性。结果从弓形虫RH株cDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段,并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达。重组蛋白的相对分子量约32kDa,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。结论RH株刚地弓形虫peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。

引用

页码：334 / 337

页数：4

共 7 条

[1]

弓形虫可溶性速殖子抗原的免疫原性蛋白质组学分析 [D].