苍术酮对肝癌HepG2细胞活性、凋亡的影响及其相关机制

目的观察苍术酮对肝癌HepG2细胞活性、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法以肝癌HepG2细胞为研究对象,分为苍术酮低、中、高剂量组(5、10、20μmol/L),对照组加入等体积的DMSO。MMT比色法检测不同浓度苍术酮处理后HepG2细胞活性。流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率及线粒体膜电位。DCFH-DA荧光探针标记法检测HepG2细胞内ROS水平。Transwell实验检测苍术酮对HepG2细胞迁移能力的影响。蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,组间的两两比较采用LSD-t检验。结果在苍术酮处理细胞24、48 h后,与对照组同一时间相比,苍术酮低、中、高剂量组的细胞活性呈下降趋势,且差异均有统计学意义(P值均<0.05),苍术酮处理HepG2细胞72 h的半数抑制率为26.19μmol/L。苍术酮低、中、高剂量组的细胞凋亡率分别为14.34%、29.32%和50.12%,均高于对照组(0.32%)(P值均<0.05)。与对照组比较,苍术酮低、中、高剂量组HepG2细胞中ROS的荧光强度明显升高(P值均<0.05)。在苍术酮处理HepG2细胞48 h后,与对照组比较,苍术酮低、中、高剂量组的细胞迁移数量明显降低(132.67±18.36、57.00±9.26、31.00±2.45 vs258.11±38.54,P值均<0.05);与对照组比较,苍术酮低、中、高剂量组能显著抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达,促进凋亡因子Bax和Cleaved caspase-3的表达,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论苍术酮能够诱导HepG2细胞凋亡,并抑制其迁移,为进一步开发利用苍术酮提供一定的实验基础。