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花椰菜ACC氧化酶基因的克隆及其RNAi对内源基因表达的抑制作用
被引：24
作者：
陈银华
张俊红
欧阳波
李汉霞
叶志彪
机构：
[1] 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,华中农业大学园艺林学学院,华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉,武汉,武汉,华中农业大学园艺林学学院,武汉,武汉,武汉,华中农业大学园艺林学学院,武汉
来源：
关键词：
花椰菜;
ACC氧化酶基因;
RNAi;
遗传转化;
D O I：
暂无
中图分类号：
S635.3 [花椰菜];
学科分类号：
摘要：
根据亲缘关系较近的几种作物ACC氧化酶氨基酸序列,设计一对简并引物,从花椰菜(Brassicaoleraceavar.botrytis)基因组中获得长1202bp的候选片段。序列分析表明该基因含有3个外显子(Exon)、2个内含子(Intron),编码区序列长756bp,编码252个氨基酸。同源性分析发现其与青花菜(Brassicaoleraceavar.Italica)上已发表mRNA序列同源率为99%(GenBank序列号:X81629),推断该基因为花椰菜ACC氧化酶基因,命名为BoACO(GenBank登录号:AY676466)。在此基础上,用BP克隆的方法构建BoACO的RNA干涉(RNAi)载体pHBACO,对花椰菜进行遗传转化,获得卡那霉素抗性转化植株5棵,分子检测证实外源片段成功导入其中3棵花椰菜基因组中。Northern杂交分析显示:转基因植株内源ACO基因转录的mRNA被降解。ACC氧化酶活性分析进一步表明,外源基因的导入大大地降低了ACC氧化酶活性。
引用
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页数：6
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