葡萄SRAP反应体系优化及引物筛选

被引：35

作者：

郭大龙 ^{[1
]}

张君玉 ^{[1
]}

李猛 ^{[1
]}

张国海 ^{[1
]}

刘崇怀 ^{[2
]}

机构：

[1] 河南科技大学林学院

[2] 中国农业科学院郑州果树研究所

来源：

基因组学与应用生物学 | 2010年 / 29卷 / 02期

关键词：

葡萄; SRAP; 体系优化; 引物筛选;

D O I：

暂无

中图分类号：

S663.1 [葡萄];

学科分类号：

摘要：

本试验利用L16(45)正交试验设计探寻葡萄SRAP-PCR反应体系中的关键因子,同时结合单因素试验简单、快捷的特点逐个对PCR反应体系的主要成分进行优化。充分利用两种方法的优点并降低试验工作量取得了较好的效果,建立了适于葡萄的SRAP反应体系。结果表明Mg2+浓度为影响葡萄SRAP-PCR反应的关键因素;优化的20μL SRAP-PCR反应体系中各组分的最适含量为:10×Buffer2.0μL,Mg2+2.5mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,引物0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U,模板DNA1.0ng/μL。利用SRAP反应体系,从100对SRAP引物组合中筛选出扩增稳定,条带清晰,多态性好的引物19对。本研究建立的适于葡萄SRAP-PCR扩增的反应体系,将为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建,分子标记辅助育种和遗传改良研究提供基础。

引用

页码：379 / 384

页数：6

共 11 条

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