利用抑制差减杂交技术分离马铃薯晚疫病抗性相关基因(英文)

被引:25
作者
田振东
柳俊
谢从华
机构
[1] 华中农业大学园林学院,华中农业大学生命科学技术学院,华中农业大学园林学院武汉,武汉,武汉
关键词
马铃薯; 晚疫病; 抗病相关基因; 抑制差减杂交(SSH); 反向Northern斑点杂交;
D O I
暂无
中图分类号
S435.32 [马铃薯(土豆)病虫害];
学科分类号
090401 ; 090402 ;
摘要
以晚疫病病原菌混合小种接种处理 4 8h的马铃薯水平抗性材料 (R gene free)叶片为目的材料 ,以未处理材料作为对照 ,用抑制差减杂交技术构建了一个富集晚疫病抗性相关基因的差减文库。应用反向Northern技术对84 0个克隆进行斑点杂交筛选 ,筛选出 15 0个病原诱导后信号明显增强的克隆。 2 6个片段测序结果表明 :部分片段基因功能与抗病性明显相关。 7个差异表达片段与GenBankEST数据库中已有晚疫病原诱导马铃薯叶片得到的EST有很高同源性 (达 95 %~ 10 0 % ) ;部分片段核苷酸或氨基酸序列分别与番茄、烟草、拟南芥等的EST序列或氨基酸序列有较高同源性 ;另有 4个基因片段在GenBankEST数据库中未找到明显的同源序列 ,可能为新发现的基因片段。
引用
收藏
页码:597 / 605
页数:9
相关论文
共 8 条
[1]   小麦抗病基因表达谱中的文库构建与筛选方法研究 [J].
骆蒙 ;
孔秀英 ;
刘越 ;
周荣华 ;
贾继增 .
遗传学报, 2002, (09) :814-819
[2]   cDNA文库的差异筛选与抑制性减数杂交相结合分离胡萝卜体细胞胚根发育相关基因 [J].
张雷 ;
杨志攀 ;
刘一鸣 ;
黄美娟 ;
吴乃虎 .
自然科学进展, 2002, (03) :39-43
[3]   用抑制差减杂交法分离和克隆梭梭幼苗受渗透胁迫诱导相关基因的cDNA片段 [J].
郭新红 ;
姜孝成 ;
潘晓玲 ;
戴玉池 ;
姜维明 ;
陈良碧 .
植物生理学报, 2001, (05) :401-406
[4]   应用抑制差减杂交法分离水稻幼穗发育早期特异表达的基因 [J].
刘军 ;
袁自强 ;
刘建东 ;
钱晓茵 ;
钱旻 ;
杨金水 .
科学通报, 2000, (13) :1392-1397
[5]   抑制性扣除杂交技术(SSH)及其研究进展 [J].
罗文波 ;
于淑娟 ;
高大维 .
生物技术, 2000, (03) :37-40
[6]   抑制性扣除杂交技术(SSH)及其在基因克隆上的研究进展 [J].
顾克余 ;
翟虎渠 .
生物技术通报, 1999, (02) :15-18
[7]  
植病研究方法[M]. 中国农业出版社 , 方中达编著, 1998
[8]  
PLANT MOLECULAR BIOLOGY[P]. 英国专利:GB9306726D0,1993-05-26