人高密度脂蛋白受体表达上调剂筛选模型的建立

被引:5
作者
刘晓辉
洪斌
王丽非
杨媛
司书毅
李元
机构
[1] 中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所生物工程室,中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所生物工程室,中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所生物工程室,中国医学科学院国协和医科大学医药生物技术研究所生物工程室,中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所生物工程室,中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所生物工程室北京,北京,北京,北京,北京,北京
基金
国家自然科学基金重点项目;
关键词
高密度脂蛋白受体; 药物筛选模型; 报告基因;
D O I
暂无
中图分类号
R965.1 [药物筛选和实验模型];
学科分类号
100602 ; 100706 ;
摘要
目的 建立靶向人高密度脂蛋白受体基因(CLA-1)调控序列的药物筛选模型,为筛选人高密度脂蛋白受体表达上调剂奠定基础。方法 PCR扩增CLA-1上游调控序列,构建重组报告基因质粒pGL3-CLAP,瞬时转染人肝癌细胞BEL-7402,通过检测荧光素酶报告基因表达水平的变化筛选人高密度脂蛋白受体表达上调剂。结果 建立了CLA-1表达上调剂筛选模型,pGL3-CLAP与阴性对照pGL3-Basic组间差异显著(P<0.001),变异系数(CV)不超过10%。对124个化合物和800个微生物次级代谢产物进行初筛和复筛,1个化合物和3个菌株发酵液为阳性。结论 该系统可有效地应用于人高密度脂蛋白受体表达上调剂的高通量筛选。
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