枯草芽孢杆菌XF1菌株中XFsacA基因的克隆及功能验证

被引：3

作者：

贾凡 ^{[1
]}

毛自朝 ^{[1
]}

王志远 ^{[2
]}

赵静 ^{[2
]}

吴毅歆 ^{[1
]}

何月秋 ^{[1
,2
]}

机构：

[1] 云南农业大学农学与生物技术学院

[2] 云南农业大学农业生物多样性应用技术国家工程中心

来源：

华南农业大学学报 | 2012年 / 33卷 / 02期

关键词：

枯草芽孢杆菌XF1; 蔗糖; 代谢; 基因克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

S476.1 [];

学科分类号：

0904 ;

摘要：

枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis XF1是从土壤中分离的一株利用蔗糖快、能高效防治根肿病的专利菌株.为探明其高效的蔗糖代谢机制,用PCR从该菌中扩增到蔗糖代谢关键基因蔗糖-6-磷酸水解酶基因(XFsacA基因),其编码的蛋白质氨基酸序列与枯草芽孢杆菌B168菌株中的XFsacA基因有97%的相似性,且发生了12个氨基酸突变.将该基因中约1.4 kb的编码框序列连接到表达载体pQE30上,构建了重组表达质粒pQE30-XFsacA,该质粒转入到不能利用蔗糖的Escherichia coli BL21中,后者能在以蔗糖为唯一碳源的M9无机离子培养基中正常生长,并表达出了一条约54 000蛋白条带.结果预示XFsacA基因氨基酸序列的替代可能是XF1高效利用蔗糖的基础,同时XFsacA基因的克隆与其在E.coli中的表达研究,为利用蔗糖发酵的工程E.coli构建奠定了基础.

引用

页码：154 / 158

页数：5

共 4 条

[1]

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