黄芪甲苷介导内皮祖细胞外泌体对高糖受损内皮细胞增殖和凋亡的影响

被引:17
作者
白雪 [1 ]
梁文菲 [1 ]
彭阿建 [1 ]
熊武 [2 ]
肖慧 [1 ]
易琼 [3 ]
余亦程 [1 ]
邹晓玲 [4 ]
机构
[1] 湖南中医药大学
[2] 湖南中医药大学第一附属医院烧伤整形外科
[3] 湖南中医药大学第一附属医院重症医学科
[4] 湖南中医药大学第一附属医院内分泌科
基金
湖南省自然科学基金;
关键词
黄芪甲苷; 内皮祖细胞; 外泌体; 糖尿病血管病变; 增殖; 凋亡;
D O I
10.13699/j.cnki.1001-6821.2021.15.025
中图分类号
R285 [中药药理学];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)介导的内皮祖细胞外泌体(EPCs-Exos)对高糖受损内皮细胞(ECs)增殖和凋亡的影响。方法从足月健康新生儿脐带血中分离、培养单个核细胞,用CD31抗体联合4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)核染鉴定,获得的EPCs用100 mg·L-1 AS-Ⅳ干预24 h。用超速离心法结合超滤法提取细胞上清液中囊泡结构,用透射电子显微镜进行形态观察,用蛋白质印迹(WB)法检测外泌体表面特征性标志蛋白CD9、CD63、CD81。体外分离、培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用vWF因子联合DAPI核染鉴定,获得的HUVECs用30 mmol·L-1葡萄糖干预120 h,随机分为实验组、对照组并设置正常组(用正常EGM-2培养基预培养120 h)。实验组用AS-IV介导下的EPCs-Exos处理24 h,对照组和正常组用等容量PBS处理24 h,用CCK-8细胞增殖检测试剂盒,用流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡情况。结果正常组、对照组和实验组OD值分别为0.73±0.00,0.45±0.00和0.74±0.01,凋亡率分别为(6.44±0.27)%,(24.41±1.12)%和(9.54±0.20)%。各组细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论高糖环境下ECs增殖能力抑制明显、凋亡率上升,而AS-IV介导的EPCs-Exos可显著促进高糖受损ECs增殖并抑制其凋亡,对ECs有明确的保护作用。
引用
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页数:3
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