深海沉积物中微量DNA的提取及应用

被引：9

作者：

赵晶

张锐

林念炜

曾润颖

机构：

[1] 厦门大学生命科学院

[2] 国家海洋局海洋生物工程重点实验室

[3] 国家海洋局海洋生物工程重点实验室厦门

[4] 厦门

来源：

海洋与湖沼 | 2003年 / 03期

关键词：

深海沉积物; 总DNA提取; 腐殖酸;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q178.53 [海洋生物];

学科分类号：

070703 ;

摘要：

采用化学裂解和酶解相结合的方法 ,进行了深海沉积物中微量DNA的提取 ,并采用DNA吸附树脂进行纯化。结果表明 ,该方法能有效地去除沉积物中的腐殖酸等抑制剂 ,每克湿重沉积物样品可得到DNA约 1 6 μg,回收率可达 95 % ,所得到的DNA分子片段均在 2 3kb左右 ,纯化后的DNA可直接应用于各种分子生物学操作。利用细菌 1 6SrDNA通用引物对所提取的深海沉积物DNA进行了PCR RFLP及系统发育分析 ,各主要细菌类群均能检出 ,证实该方法可以应用于深海等极端环境中微生物的多样性调查、系统发育分析以及特殊功能基因的筛选 ,同时还可应用于环境样品中生物量的半定量估计

引用

页码：313 / 321

页数：9

共 5 条

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