甘薯基因组DNA高效快速提取方法

被引：34

作者：

李强 ^{[1
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揭琴 ^{[1
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刘庆昌 ^{[1
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王欣 ^{[2
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马代夫 ^{[2
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翟红 ^{[1
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王玉萍 ^{[1
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机构：

[1] 中国农业大学农业部作物基因组学与遗传改良重点开放实验室,北京市作物遗传改良重点实验室,教育部作物杂种优势研究与利用重点实验室

[2] 中国农业科学院甘薯研究所,国家甘薯改良中心

来源：

分子植物育种 | 2007年 / 05期

关键词：

甘薯; 基因组DNA; 改进CTAB法;

D O I：

暂无

中图分类号：

S531 [甘薯（红薯）];

学科分类号：

摘要：

甘薯基因组DNA传统的CTAB提取法,提取DNA质量好,但提取效率不高。为满足甘薯分子标记辅助育种、核心种质和遗传连锁图谱构建以及转基因植株检测的需要,通过对传统的CTAB法进行改进,本研究建立了一种高效快速价廉的甘薯及其近缘野生种基因组DNA提取方法,适合于PCR扩增以及AFLP分析。本方法使用1.5mL离心管和专用棒槌,整个过程转管1次,提取的DNA主带明显,片段大小一致,得率达5μg/mg叶片冻干粉。提取质量可靠,RAPD-PCR和酶切后AFLP扩增,与传统CTAB法提取DNA扩增结果没有明显差异。与传统的CTAB方法相比,该方法快速(提取过程不足30min),效率高,从10mg叶片冻干粉中一次可提取50μg左右的DNA模板,操作简便,污染降低,实用性强。

引用

页码：743 / 746

页数：4

共 8 条

[1] 一种快速提取甘薯基因组DNA方案的建立 [J].

吴秋云 ;

罗文彬 ;

邱永祥 ;

蔡南通 .

山西农业大学学报(自然科学版), 2006, (02) :119-120+124

[2] 中国甘薯地方品种的遗传多样性分析 [J].

贺学勤 ;

刘庆昌 ;

王玉萍 ;

翟红 ;

不详 .

中国农业科学 , 2005, (02) :250-257

[3] 一种改进的水稻总DNA的快速提取方法附视频 [J].

张凤娟 ;

张满良 ;

朱水芳 .

植物检疫, 2004, (06) :330-332

[4] 苹果基因组DNA的快速提取 [J].

赵玉军 ;

李光晨 ;

王涛 ;

祝军 .

农业生物技术学报, 2002, (02) :124-126

[5] 快速提取用于PCR分析的几种蔬菜DNA的方法 [J].

孟祥栋 ;

马红 ;

盖树鹏 .

应用与环境生物学报, 1998, (03) :251-254

[6]

Sun-Hyung Kim,Tatsuro Hamada.Rapid and Reliable Method of Extracting DNA and RNA from Sweetpotato, Ipomoea batatas (L). Lam[J].Biotechnology Letters,2005(23)

[7] An easy, rapid, and inexpensive DNA extraction method, “one-minute DNA extraction,” for PCR in potato [J].

Kazuyoshi Hosaka .

American Journal of Potato Research, 2004, 81 :17-19

[8] A Rapid DNA Minipreparation Method Suitable for AFLP and Other PCR Applications [J].

D.-H. Chen ;

P.C. Ronald .

Plant Molecular Biology Reporter, 1999, 17 :53-57

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