苹果SRAP-PCR反应体系的建立

被引:31
作者
司鹏 [1 ]
戴洪义 [2 ]
薛华柏 [1 ]
张玉刚 [2 ]
郭俊英 [1 ]
曹尚银 [1 ]
机构
[1] 中国农业科学院郑州果树研究所
[2] 青岛农业大学园林园艺学院
关键词
苹果; SRAP-PCR; 正交分析;
D O I
10.13925/j.cnki.gsxb.2010.02.003
中图分类号
S661.1 [苹果];
学科分类号
090201 [果树学];
摘要
以苹果(Malus domestica Borkh.)品种Telamon及Telamon×Fuji的F1代为试材,采用改良的CTAB法提取苹果叶片的DNA,利用正交设计L16(45)和直观分析以及方差分析相结合,探讨了Mg2+、dNTPs、Primer、Taq聚合酶、模板DNA用量对苹果SRAP-PCR反应的影响。建立了总体积为10μL的苹果SRAP-PCR反应体系,Mg2+浓度为2.0mmol.L-1,dNTPs浓度为0.8 mmol.L-1,Primer浓度为0.2μmol.L-1,Taq DNA聚合酶含量为0.6 U,DNA含量为60 ng,并含1μL 10×buffer(Mg2+free)。应用该反应体系,用不同的引物组合对48份苹果样品DNA进行SRAP-PCR扩增,结果显示反应体系具有较高的稳定性。
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