长、短链探针以链延伸反应提高基因传感器检测MRSA灵敏度的实验研究

目的　利用链延伸反应的原理延长引物链以提高石英谐振式基因传感器表面的质量负载 ,从而提高传感器检测 MRSA的灵敏度。方法　以不对称 PCR的反应产物做为长链探针 ,人工合成的寡核苷酸片段为短链探针 ,在基因传感器阵列表面分别固定上金黄色葡萄球菌 mec A及 fem A的长链及短链探针共 4种探针片段 ,与相应的靶序列杂交后 ,加入 Klenow酶 ,37℃进行链延伸反应 1h。结果　长、短链探针均有效地固定在了传感器表面。mec A、fem A短链探针在链延伸反应前的检测灵敏度为 0 .5 nm ol/L,但经链延伸反应后检测灵敏度提高到了0 .0 5 nmol/L;而长链探针却无法与相应的基因组靶序列发生杂交。结论　短链探针链延伸反应有效地提高了石英谐振式基因传感器的灵敏度 ,但该法不适用于长链探针。