富含多糖的转基因石斛基因组DNA提取方法(英文)

被引：24

作者：

张妙彬

潘丽晶

范干群

陈继敏

程萍

机构：

[1] 珠海市农业科学研究中心

来源：

分子植物育种 | 2009年 / 7卷 / 01期

关键词：

石斛兰; DNA提取; 多糖; PCR; Southern杂交;

D O I：

暂无

中图分类号：

S682.31 [兰科植物];

学科分类号：

摘要：

在石斛兰转基因研究中,需通过PCR和Southern杂交等手段检测外源基因是否转入并整合到转化植株基因组。由于转化石斛植株生长缓慢,且含有多糖,因此从转化植株中提取高质量的基因组DNA以尽快对转基因苗进行分子检测存在较大困难。本研究旨在通过改良现有的DNA提取法(CTAB法或SDS法),克服转化石斛植株基因组DNA提取中碰到的产量低,纯度不高而导致难以进行PCR或酶切等问题。在本研究所用的3种改良法中,方法Ⅱ能从少量的转化石斛苗中提取出高产量和高纯度的基因组DNA。研究结果表明方法Ⅱ提取的基因组DNA完全适用于转基因石斛的外源基因PCR扩增,限制性酶切和Southern杂交分析。

引用

页码：209 / 214

页数：6

共 12 条

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