利用正交设计优化一品红SRAP反应体系

被引:10
作者
姜维华 [1 ]
陶俊 [1 ]
冯立国 [1 ]
苏家乐 [2 ]
机构
[1] 扬州大学园艺与植物保护学院
[2] 江苏省农业科学院园艺研究所
关键词
一品红; SRAP; 正交设计; 优化;
D O I
暂无
中图分类号
S685.23 [一品红];
学科分类号
摘要
运用L16(45)正交设计对影响一品红SRAP反应的5个因素(DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶)在4个水平上进行优化试验,PCR结果采用DPSV3.01软件分析。结果表明,各因素对SRAP反应的影响依次为:Mg2+>引物>dNTPs>DNA模板>Taq酶;一品红SRAP反应最佳体系为:50μL的PCR体系中含有Mg2+2.5mmol·L-1、引物500pmol·L-1、dNTPs0.20mmol·L-1、DNA模板100ng、Taq酶1.0U;应用最佳反应体系对PCR程序中的退火温度进行优化,得出SRAP-PCR反应适宜的第一步退火温度为36℃,第二步退火温度为50℃。
引用
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