目的:建立苦丁茶老叶中槲皮素和山柰素含量的HPLC测定方法。方法:色谱柱为Nova-Pak C18柱(3.9mm×300mm,4μm)柱,以甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)为流动相,流速为0.7mL.m in-1,检测波长为360nm。结果:测定组分槲皮素、山柰素与其他组分的色谱峰基线分离;槲皮素加样回收率平均值为99.24%,RSD为1.60%,山柰素加样回收率平均值为98.77%,RSD为2.11%。结论:该方法样品处理简单,准确度高,分离效能好,适合于苦丁茶老叶中槲皮素和山柰素含量的测定。