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纳米金PCR技术检测副溶血弧菌方法的建立与初步应用
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刘阳
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孔繁德
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彭小莉
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厦门出入境检验检疫局
厦门出入境检验检疫局
彭小莉
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徐淑菲
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厦门出入境检验检疫局
厦门出入境检验检疫局
徐淑菲
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吴德峰
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福建农林大学动物科学学院
厦门出入境检验检疫局
吴德峰
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林方
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厦门出入境检验检疫局
厦门出入境检验检疫局
林方
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机构
:
[1]
厦门出入境检验检疫局
[2]
福建农林大学动物科学学院
来源
:
福建畜牧兽医
|
2012年
/ 34卷
/ 01期
关键词
:
副溶血弧菌;
纳米PCR;
D O I
:
暂无
中图分类号
:
S941 [鱼病学];
学科分类号
:
摘要
:
纳米金PCR是在普通PCR基础上发展起来的新技术,它能够明显提高普通PCR的灵敏度和特异性。根据副溶血弧菌(VP)的toxR基因序列,应用primer6.0设计一对特异性引物,建立了纳米金PCR方法,并对该方法的最佳反应条件、循环数、特异性和灵敏度进行测定。采用2.0%琼脂糖电泳进行检测,结果表明能扩增得到与试验设计相符的208bp(VP)的特异性条带;与溶藻弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌、沙门氏菌、枸橼酸杆菌没有交叉反应;纯培养细菌检测灵敏度为3cfu/反应体系。与普通PCR法进行比较,该方法检测灵敏度比普通PCR高10倍。经临床检测,从150份带鱼、鱿鱼和鱼粉中检出5份阳性样品,与常规细菌分离鉴定方法符合率100%。该试验方法的建立对于加强进出口水产品中VP的检验检疫具有十分重要的意义。
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羊小海
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王柯敏
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张新中
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文万侥
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徐先栋
吴秀红
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吴秀红
周永灿
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谢珍玉
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Cloning and sequencing of the Vibrio parahaemolyticus fur gene
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Faculty of Pharmaceutical Sciences, Okayama University
Shinoda, S
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MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY,
1997,
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金纳米颗粒介导不对称PCR:制备单链核酸的新方法
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羊小海
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双重PCR在创伤弧菌(Vibrio vulnificus)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolytious)快速检测中的应用
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吴秀红
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周永灿
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谢珍玉
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谢珍玉
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现代渔业信息,
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纳米银颗粒增强聚合酶链式反应长片段DNA反复扩增的特异性
王群
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海产品中副溶血弧菌PCR检测方法的建立与评价
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封幼玲
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中国卫生检验杂志,
1997,
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[6]
溶藻弧菌噬菌体的分离
林业杰
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林业杰
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胡海林
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微生物学报,
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Nanoparticle PCR: Nanogold‐Assisted PCR with Enhanced Specificity[J] . HaikuoLi,JiehuanHuang,JunhongLv,HongjieAn,XiaodongZhang,ZhizhouZhang,ChunhaiFan,JunHu.Angewandte Chemie . 2005 (32)
[9]
Cloning and sequencing of the Vibrio parahaemolyticus fur gene
Yamamoto, S
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MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY,
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