纳米金PCR技术检测副溶血弧菌方法的建立与初步应用

被引:13
作者
刘阳 [1 ,2 ]
孔繁德 [1 ]
彭小莉 [1 ]
徐淑菲 [1 ]
吴德峰 [2 ]
林方 [1 ]
机构
[1] 厦门出入境检验检疫局
[2] 福建农林大学动物科学学院
关键词
副溶血弧菌; 纳米PCR;
D O I
暂无
中图分类号
S941 [鱼病学];
学科分类号
摘要
纳米金PCR是在普通PCR基础上发展起来的新技术,它能够明显提高普通PCR的灵敏度和特异性。根据副溶血弧菌(VP)的toxR基因序列,应用primer6.0设计一对特异性引物,建立了纳米金PCR方法,并对该方法的最佳反应条件、循环数、特异性和灵敏度进行测定。采用2.0%琼脂糖电泳进行检测,结果表明能扩增得到与试验设计相符的208bp(VP)的特异性条带;与溶藻弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌、沙门氏菌、枸橼酸杆菌没有交叉反应;纯培养细菌检测灵敏度为3cfu/反应体系。与普通PCR法进行比较,该方法检测灵敏度比普通PCR高10倍。经临床检测,从150份带鱼、鱿鱼和鱼粉中检出5份阳性样品,与常规细菌分离鉴定方法符合率100%。该试验方法的建立对于加强进出口水产品中VP的检验检疫具有十分重要的意义。
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