金纳米颗粒介导不对称PCR:制备单链核酸的新方法

被引:8
作者
孟祥贤
羊小海
王柯敏
郭秋平
黄青山
机构
[1] 湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室化学化工学院生物医学工程中心生物纳米与分子工程湖南省重点实验室
基金
湖南省自然科学基金;
关键词
金纳米颗粒; 不对称PCR; 单链核酸; 地中海贫血病;
D O I
暂无
中图分类号
Q503 [生物化学技术];
学科分类号
摘要
单链核酸杂交技术是现代医学生物学等领域诊断与检测的重要手段.传统不对称PCR制备单链核酸的方法,需要严格控制引物和模板数量及反复摸索退火温度,操作复杂.发展了一种利用金纳米颗粒介导的不对称PCR快速制备单链核酸的新方法.浓度为0.1~0.5nmol/L金纳米颗粒可显著改善PCR扩增特异性,提高扩增效率.在不对称PCR扩增中,加入合适浓度的金纳米颗粒方便快捷得到单链核酸产物,不需要进行复杂的条件优化等操作步骤.通过快速制备地中海遗传病两个点突变CD17(A→T)和IVS-2-654(C→T)位点的单链DNA靶序列,证实该方法是一种简便、有效的获得单链核酸的方法,有望在单链核酸技术领域发挥重要作用.
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