双重LAMP技术快速检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的方法学研究

被引：11

作者：

相兴伟 ^{[1
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郑斌 ^{[1
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顾丽霞 ^{[2
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周向阳 ^{[3
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周秀锦 ^{[3
]}

邵宏宏 ^{[3
]}

胡兴娟 ^{[3
]}

周宇芳 ^{[1
]}

机构：

[1] 浙江省海洋开发研究院

[2] 浙江海洋学院

[3] 舟山出入境检验检疫局

来源：

现代食品科技 | 2017年 / 33卷 / 01期

关键词：

副溶血性弧菌; 霍乱弧菌; 同时检测;

D O I：

10.13982/j.mfst.1673-9078.2017.1.039

中图分类号：

TS254.7 [水产制品的标准与检验];

学科分类号：

摘要：

建立环介导等温扩增技术(LAMP)同时快速检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的方法。针对副溶血性弧菌tox R和霍乱弧菌omp W基因设计特异性引物,优化反应条件,建立水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的检测方法,并同时应用双重LAMP技术和PCR技术对实验菌株进行副溶血性弧菌和霍乱弧菌检测,比较两种方法的特异性和灵敏度。LAMP的最佳反应温度为61℃,在此条件下,双重LAMP检测技术检测副溶血性弧菌和霍乱弧菌DNA的敏感度可达3.12 fg,且与其他常见的细菌株无交叉反应,特异性为100%;对模拟食品样品进行直接检测时检测限为50 cfu/m L;对60份水产样品进行检测时,6份样品出现LAMP及PCR阳性,而传统培养方法检测出4份阳性。实验结果表明所建立的双重LAMP技术在检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌时灵敏度、特异性高,时间成本低,适合于水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的快速检测。

引用

页码：253 / 260

页数：8

共 10 条

[1] 多重PCR方法检测食品中霍乱弧菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌
江迎鸿
谭贵良
陈亚波
李向丽
[J]. 广东农业科学, 2011, 38 (10) : 135 - 137+150
[2] 多重荧光定量PCR同时检测霍乱弧菌、副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法研究
李宏
杨大伟
刘云国
孙涛
王建广
雷质文
周裔斌
贾俊涛
姜英辉
[J]. 中国卫生检验杂志, 2011, 21 (05) : 1180 - 1182
[3] 副溶血性弧菌ERIC-PCR分型及毒力基因检测研究
丁久法
潘迎捷
陈洪友
唐明未
秦红友
赵勇
陈敏
[J]. 食品工业科技, 2010, 31 (08) : 137 - 141
[4] 水产品中致病性弧菌PCR快速检测研究
冯家望
王小玉
李丹琳
唐食明
刘锐
[J]. 中国国境卫生检疫杂志, 2007, (06) : 383 - 386
[5] 环介导等温扩增核酸技术及其应用
匡燕云
李思光
罗玉萍
[J]. 微生物学通报, 2007, (03) : 557 - 560
[6] SN/T 0173-2010. 进出口食品中副溶血性弧菌检验方法[S]. 2010
[7] SN/T 1022-2010. 进出口食品中霍乱弧菌检验方法[S]. 2010
[8] Development of monoclonal antibody based sandwich ELISA for the rapid detection of pathogenic Vibrio parahaemolyticus in seafood
Kumar, Ballamoole Krishna
Raghunath, Pendru
Devegowda, Devananda
Deekshit, Vijay Kumar
Venugopal, Moleyur Nagarajappa
Karunasagar, Iddya
Karunasagar, Indrani
[J]. INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD MICROBIOLOGY, 2011, 145 (01) : 244 - 249
[9] Design and Validation of a Novel Multiplex Real-Time PCR Assay for Vibrio Pathogen Detection
Tebbs, Robert S.
Brzoska, Pius M.
Furtado, Manohar R.
Petrauskene, Olga V.
[J]. JOURNAL OF FOOD PROTECTION, 2011, 74 (06) : 939 - 948
[10] Vibrio parahaemolyticus : A concern of seafood safety[J] . Yi-Cheng Su,Chengchu Liu.Food Microbiology . 2007 (6)

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