水貂肠炎病毒VP2基因原核表达及鉴定

被引：9

作者：

林鹏 ^{[1
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王红梅 ^{[2
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王建科 ^{[1
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赵航 ^{[1
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郭利 ^{[1
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杨勇 ^{[1
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程悦宁 ^{[1
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张淼 ^{[1
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程世鹏 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国农业科学院特产研究所吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室

[2] 山东省文登市畜牧兽医技术服务中心

来源：

经济动物学报 | 2015年 / 19卷 / 03期

关键词：

水貂肠炎病毒; VP2基因; 原核表达;

D O I：

10.13326/j.jea.2015.1068

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

采用PCR技术扩增MEV VP2基因,将该基因片段定向克隆原核表达载体PET-30a,构建MEV VP2基因原核表达重组质粒PET-30a-VP2。将该重组质粒转化到宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导后进行SDSPAGE和Western-blotting分析。结果表明:该基因全长1 755 bp,其目的基因序列完全正确,能编码584个氨基酸。利用载体上的His标签对其进行纯化,经SDS-PAGE鉴定该重组蛋白以包涵体的形式存在,大小约为70 ku;Western-blotting验证该重组蛋白具有被抗MEV血清识别的特性,具有良好的反应原性,可为MEV基因工程亚单位疫苗、免疫学诊断方法等提供参考。

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页数：7

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