里氏木霉RutC30常温常压等离子体(ARTP)诱变筛选pyr4基因缺陷型菌株及转化系统的建立

被引:13
作者
安莉颖 [1 ]
易欣欣 [2 ]
秦丽娜 [3 ]
施思 [1 ]
陶勇 [3 ]
伍红 [1 ]
董志扬 [3 ]
机构
[1] 西南民族大学生命科学与技术学院
[2] 北京农学院食品科学与工程学院
[3] 中国科学院微生物研究所
基金
国家高技术研究发展计划(863计划);
关键词
里氏木霉; 等离子体; 诱变; pyr4基因;
D O I
暂无
中图分类号
Q933 [微生物遗传学];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
以里氏木霉Trichoderma reesei重要工业生产菌Rut C30为出发菌株,通过等离子体(ARTP)诱变筛选,以5‐氟乳清酸(5‐FOA)和尿苷(Uridine)进行筛选,获得一株pyr4基因缺陷株Rut C30ΔU3。用含有野生型里氏木霉pyr4基因的互补质粒转化突变株,可回复野生性状。经测序发现其pyr4基因在核酸序列多个位点发生突变,其中包括两个错义突变和一个移码突变,从而导致乳清酸核苷‐5′‐磷酸脱羧酶失活。经遗传稳定性研究分析,传代5次后仍保持良好的尿苷依赖性、去葡萄糖阻遏以及高产纤维素酶特性。经实验筛选获得了pyr4基因缺陷菌株可作为基因表达系统的受体菌株,建立了以尿苷营养缺陷为筛选标记的木霉转化系统。
引用
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页码:1272 / 1280
页数:9
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