TRAIL及联合阿霉素治疗骨肉瘤的动物实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)以及TRAIL联合阿霉素(ADM)对裸鼠移植性骨肉瘤的治疗作用及机制。方法取对数生长的MG-63骨肉瘤细胞,以5×10～6/ml浓度的细胞悬液0.2 ml接种于裸鼠下肢外侧皮下,建立裸鼠肿瘤模型随机分组。各以1、2μg TRAIL,15μg ADM,1μg TRAIL+15μg ADM和100μl生理盐水腹腔注射,观察肿瘤生长速度,处死裸鼠取血清,应用血清碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测血清ALP的活性,取下瘤体应用TUNEL技术检测瘤体中细胞凋亡情况,应用免疫组化法检测Bax基因的表达,应用RT-PCR技术分析TRAIL受体表达的情况。结果肿瘤生长曲线显示:腹腔注射TRAIL蛋白组与注射生理盐水组相比,裸鼠皮下移植瘤生长更慢,且2μg TRAIL组的抑制作用强于1μg TRAIL组;TRAIL与ADM联用较两种药物单用具备更强的抑瘤作用。各实验组间ALP活性差异统计学意义。细胞凋亡的TUNEL检测显示TRAIL与ADM联用组较两种药物单用组有更多的凋亡细胞出现。免疫组化检测Bax基因的表达显示TRAIL与ADM联用出现Bax蛋白表达量上调。RT-PCR检测显示TRAIL与ADM联用出现TRAIL-R2的mRNA表达上调。结论在活体水平TRAIL具有促进骨肉瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长的作用,且这种作用一定范围内随药物的剂量提高而增强。TRAIL与ADM联用具备协同效应,其机制与TRAIL-R2的mRNA和Bax基因的表达上调有关。