一步法多重RT-PCR禽流感病毒分型诊断法的建立与应用

被引：3

作者：

吕长荣 ^{[1
]}

乔海莲 ^{[1
]}

杨增岐 ^{[1
]}

陈杰 ^{[2
]}

顾节清 ^{[1
]}

李晓成 ^{[2
]}

机构：

[1] 西北农林科技大学动物科技学院

[2] 农业部动物检疫所国家动物流行病学研究中心

来源：

西北农林科技大学学报(自然科学版) | 2007年 / 04期

关键词：

禽流感病毒; M基因; HA基因; RT-PCR; 诊断方法;

D O I：

10.13207/j.cnki.jnwafu.2007.04.015

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

根据禽流感病毒(AIV)的M基因序列设计合成了1对AIVM基因的通用诊断引物AMDI／AMD2,针对H5N1、H9N2两种亚型的HA基因分型设计合成了2对分型诊断引物H15D1／H5D2,H9D1／H9D2。采用一步法多重RT-PcR技术建立了一种禽流感病毒快速分型诊断方法,并对其特异性和灵敏度进行验证。结果表明,该诊断方法速度快,一般只需要28～30 h即可鉴定出结果,比病毒分离鉴定(5～7 d)至少缩短4～6 d;特异性强,试验组53株AIV全部扩增出与预期同样长度的目的条带,与病毒分离及血清学鉴定方法的检测结果完全一致。对照组中新城疫病毒(NDV)、减蛋综合征病毒(EDS76V)、传染性支气管炎病毒(IBV)均未扩增出特异性基因条带,;灵敏度高,试验组将AIV接种SPF鸡胚,培养后的鸡胚尿囊液(AAF)进行10-2稀释后,仍可以检测到其中的AIV。

引用

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页数：5

共 7 条

[1] 要正视禽流感的综合预防 [J].