通用引物多重PCR新技术对番木瓜转基因成分检测的研究

被引：6

作者：

白卫滨 ^{[1
]}

李宵 ^{[1
]}

朱翠娟 ^{[1
]}

文罗娜 ^{[1
]}

王丽芳 ^{[1
]}

卢军利 ^{[1
]}

欧仕益 ^{[1
]}

孙建霞 ^{[1
,2
]}

机构：

[1] 暨南大学食品科学与工程系

[2] 广东工业大学轻工化工学院

来源：

现代食品科技 | 2016年 / 32卷 / 04期

关键词：

转基因; 检测; 多重PCR; 通用引物;

D O I：

10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.4.036

中图分类号：

TS255.7 [果蔬加工品标准与检验];

学科分类号：

摘要：

为了满足能够同时对多个靶标进行检测,克服传统多重PCR的引物间排斥、重现性差等缺点的要求,建立通用引物多重PCR新方法对番木瓜中转基因成分进行高效、快速的检测。选用三种转基因番木瓜(Event 55-1、"GM-YK"和"华农一号")和非转基因番木瓜("台农2号")的新鲜叶片为研究对象,根据三种转基因番木瓜的外源基因和内标木瓜蛋白酶基因(papain)序列,设计五种特异性引物。通过比较不加入接头的特异性引物的PCR验证结果,发现复合引物(带通用接头的引物)无论在单重PCR或者多重PCR的检测中的电泳条带均更为明亮清晰。而由灵敏度的对比,可以得出通用引物多重PCR灵敏度比普通引物的灵敏度提高了1个数量级。通用引物多重PCR新技术较普通多重PCR方法检测番木瓜中转基因成分拥有更低的检测限和灵敏度,为转基因成分的快速检测提供一种新技术。

引用

页码：229 / 234

页数：6

共 12 条

[1] 采用多重PCR技术检测转基因番木瓜华农一号
白卫滨
曹春廷
朱翠娟
文罗娜
吴贤权
欧仕益
孙建霞
[J]. 食品与发酵工业, 2015, 41 (06) : 165 - 169
[2] 转番木瓜环斑病毒复制酶基因番木瓜的多重定性检测
阮小蕾
马丽娟
李华平
[J]. 湖南农业大学学报(自然科学版), 2010, 36 (06) : 626 - 629+682
[3] 抗病毒转基因番木瓜的实时PCR检测
韩建勋
陈红运
邓婷婷
杨雷亮
黄文胜
陈颖
[J]. 检验检疫学刊, 2010, 20 (01) : 15 - 20
[4] 转基因番木瓜“华农一号”事件特异性定性PCR检测方法的建立
姜大刚
周峰
姚涓
穆虹
梅曼彤
[J]. 华南农业大学学报, 2009, 30 (01) : 37 - 41
[5] Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification assay for rapid detection of Papaya ringspot virus.[J].Wentao Shen;Decai Tuo;Pu Yan;Yong Yang;Xiaoying Li;Peng Zhou.Journal of Virological Methods.2014,
[6] Application of a qualitative and quantitative real-time polymerase chain reaction method for detecting genetically modified papaya line 55-1 in papaya products
Nakamura, Kosuke
Akiyama, Hiroshi
Takahashi, Yuki
Kobayashi, Tomoko
Noguchi, Akio
Ohmori, Kiyomi
Kasahara, Masaki
Kitta, Kazumi
Nakazawa, Hiroyuki
Kondo, Kazunari
Teshima, Reiko
[J]. FOOD CHEMISTRY, 2013, 136 (02) : 895 - 901
[7] Study on the compositional differences between transgenic and non-transgenic papaya (Carica papaya L.)
Jiao, Zhe
Deng, Jianchao
Li, Gongke
Zhang, Zhuomin
Cai, Zongwei
[J]. JOURNAL OF FOOD COMPOSITION AND ANALYSIS, 2010, 23 (06) : 640 - 647
[8] A novel common primer multiplex PCR (CP-M-PCR) method for the simultaneous detection of meat species.[J].Weibin Bai;Wentao Xu;Kunlun Huang;Yanfang Yuan;Sishuo Cao;Yunbo Luo.Food Control.2008, 4
[9] Development and application of microsatellite markers for genomic analysis of papaya
Eustice, Moriah
Yu, Qingyi
Lai, Chun Wan
Hou, Shaobin
Thimmapuram, Jyothi
Liu, Lei
Alam, Maqsudul
Moore, Paul H.
Presting, Gernot G.
Ming, Ray
[J]. TREE GENETICS & GENOMES, 2008, 4 (02) : 333 - 341
[10] Purification of papain from Carica papaya latex:: Aqueous two-phase extraction versus two-step salt precipitation
Nitsawang, Sarote
Hatti-Kaul, Rajni
Kanasawuda, Pawinee
[J]. ENZYME AND MICROBIAL TECHNOLOGY, 2006, 39 (05) : 1103 - 1107

← 1 2 →