果胶裂解酶、木聚糖酶及果胶裂解酶、木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达

被引：10

作者：

高秋芳 ^{[1
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郭安平 ^{[1
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孔华 ^{[1
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邓伟科 ^{[1
,2
]}

贺立卡 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室

[2] 海南大学农学院

来源：

广东农业科学 | 2010年 / 37卷 / 08期

关键词：

果胶裂解酶; 木聚糖酶; 表达; 毕赤酵母;

D O I：

10.16768/j.issn.1004-874x.2010.08.002

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

运用RT-PCR技术,从绿色木霉(AS3.3711)mRNA中扩增出木聚糖酶基因xyn2,并与质粒pPIC9K相连,构建了表达载体pPIC9K-xyn2,转化毕赤酵母GS115,并且将pPIC9K-xyn2和pPIC9K-PelC(果胶裂解酶)同时转化毕赤酵母GS115,通过组氨酸营养缺陷型筛选,G418高拷贝菌株筛选,以及摇瓶诱导表达筛选,分别得到一株高表达木聚糖酶毕赤酵母菌株X5和一株同时高表达木聚糖酶和果胶裂解酶毕赤酵母菌株PX6。同时,将一株高表达果胶裂解酶毕赤酵母菌株P2保存。重组酶酶学性质分析表明,P2和PX6分泌果胶裂解酶,X5和PX6分泌木聚糖酶最适温度均为50℃;P2分泌果胶裂解酶最适pH5.4,最大酶活为14.2U/mL;X5分泌木聚糖酶最适pH6.0,最大酶活为5.8U/mL;PX6分泌果胶裂解酶最适pH5.4,最大酶活为12.6U/mL,分泌木聚糖酶最适pH6.0,最大酶活为4.2U/mL。

引用

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共 6 条

[1]

果胶裂解酶基因PelC表达载体的构建及原核表达分析 [J].