siRNA沉默肝癌细胞报告基因瞬时表达效应的定量分析

被引：4

作者：

方天翎

陆敏强

蔡常洁

杨扬

李华

许赤

陈规划

机构：

[1] 中山大学第三附属医院肝移植科

来源：

中国药理学通报 | 2007年 / 08期

基金：

中国博士后科学基金;

关键词：

小分子干扰RNA; 肝细胞癌; 绿色荧光蛋白;

D O I：

暂无

中图分类号：

R735.7 [肝肿瘤];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的研究小分子干扰RNA(siRNA)特异性抑制肝癌细胞基因瞬时表达的可行性和基因沉默效率。方法凝胶电泳成像观察siRNA体外孵育后的降解性,利用Cy3示踪观察其转染HepG2细胞后动力学变化。将报告基因(GFP)和siRNA共同瞬时转染至HepG2细胞,流式细胞仪、Western blot RT-PCR等分析特异性siRNA抑制报告基因瞬时表达的效应。结果siRNA在空白培养液中和转染细胞内可较长时间保持相对稳定。与空白和非特异siRNA相比,GFPsiR-NA明显抑制GFP蛋白产物和mRNA的表达(P<0·05)。结论特异性siRNA能高效沉默人肝癌细胞转染基因的瞬时表达,为基因治疗提供了一种新的治疗策略。

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页码：997 / 1001

页数：5

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