β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

被引：1

作者：

李春华

廖贵芹

张桂敏

马立新

机构：

[1] 湖北大学生命科学学院

[2] 湖北大学生命科学学院湖北武汉

[3] 湖北武汉

来源：

湖北大学学报(自然科学版) | 2005年 / 03期

关键词：

基因组文库; β-1,4-内切葡聚糖酶基因; 大肠杆菌表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

运用选择性培养基LBCMC从环境土样中分离得到一株能利用羧甲基纤维素的芽孢杆菌Bacillus sp.NW-2004 a,并运用“鸟枪”克隆法构建了其基因组文库,且从此基因组文库中筛选得到两个阳性克隆.对其中一阳性克隆中插入的DNA片段(命名为GLUD)进行序列测定,发现了一长度为2 502 bp的开放阅读框(ORF),可编码834个氨基酸.BLAST分析结果表明,该基因与Bacillus sp.KSM-S237来源的纤维素酶基因AB018420具86%相似性,所编码的多肽与Bacillus sp.KSM-64来源的β-1,4-内切葡聚糖酶具89%的相似性,故该基因是一新发现的β-1,4-内切葡聚糖酶基因.该序列已收录于Genebank,登录号AY663839.另外,以CpoI andNotI限制性内切酶双酶切衍生于质粒pGEX的大肠杆菌表达载体pHBM625,然后将经T4 DNA polym erase处理后的β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆至载体pHBM625中得到重组质粒pH-BM625G lu,最后通过平板检测及SDS-PAGE凝胶电泳,均检测到该基因在大肠杆菌XL10-G lod中的表达.

引用

页码：275 / 279

页数：5

共 6 条

[1] β-葡聚糖的抗营养作用及β-葡聚糖酶在饲料中的应用 [J].