一种新型天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体融合蛋白S的构建及表达

被引：3

作者：

苏志坚

吴晓萍

郑青

黄亚东

庞实锋

冯雅

李校堃

机构：

[1] 暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学医药生物技术研究开发中心,暨南大学医药生物技术研究开发中心,暨南大学药学院生物制药教研室广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州

来源：

暨南大学学报(自然科学与医学版) | 2004年 / 04期

关键词：

天蚕素杂合肽AD; aFGF突变体; 融合蛋白S;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的 :构建和表达一种带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和人酸性成纤维细胞生长因子 (acidicfibroblastgrowthfactor ,aFGF)突变体的融合蛋白S ,在创伤皮肤表面应用时能自动裂解成有抗感染功能的天蚕素杂合肽AD和皮肤修复功能的aFGF突变体。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD基因和aFGF突变体基因。再利用两者作为模板 ,用PCR方法扩增出编码融合蛋白S的DNA。将该DNA片段插入到载体pPICZαA中 ,并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd116 8中 ,Zeocin抗性筛选重组转化子。甲醇诱导 72h ,SDS -PAGE电泳检测融合蛋白S的表达 ,并用Western -blot杂交检测融合蛋白S的免疫原性。结果 :筛选出的重组转化株在甲醇诱导后能表达相对分子质量约为 190 0 0的融合蛋白S ,而该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应。结论 :用PCR方法获得编码含凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体的融合蛋白SDNA ,并在毕赤酵母中实现了表达

引用

页码：420 / 425

页数：6

共 9 条

[1]

人转化生长因子TGF-β3基因合成及其在大肠杆菌中的表达 [J].