食品中4种肉类成分多重PCR的快速鉴别方法

被引:60
作者
何玮玲 [1 ]
张驰 [2 ]
杨静 [1 ]
黄明 [1 ]
杨军 [2 ]
机构
[1] 南京农业大学食品科技学院/肉品加工与质量控制教育部重点实验室
[2] 南京市产品质量监督检验院
关键词
多重PCR; 鉴别; 猪肉; 牛肉; 羊肉; 鸡肉;
D O I
暂无
中图分类号
TS251.7 [产品标准与检验];
学科分类号
083203 ;
摘要
【目的】建立快速可靠的用于食品中4种肉类(猪肉、牛肉、羊肉和鸡肉)成分快速鉴别的通用引物多重PCR(universal primers-multiplex PCR,UP-M-PCR)方法。【方法】使用DNeasy试剂盒提取法、SDS-蛋白酶K法和CTAB-蛋白酶K法分别提取肉类中总DNA,通过比较提取效率和纯度,确定提取肉类中总DNA的方法;基于动物线粒体细胞色素b基因的差异性位点,设计两组各5条长度不同的多重PCR引物,建立并优化多重PCR反应体系,通过电泳检测扩增产物分子量差异实现4种肉类的快速鉴别;应用优化的多重PCR方法对80份市售食品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性。【结果】SDS-蛋白酶K法与DNeasy试剂盒提取法的DNA效率显著优于CTAB-蛋白酶K法;在优化的反应条件下,选择特异性高、序列较长的多重PCR引物可有效地进行食品中猪、牛、羊和鸡源性成分的快速鉴定,检测灵敏度达到皮克级DNA;对市售食品样本的鉴别验证了方法的实用价值。【结论】多重PCR方法精确稳定,可用于食品中多种动物源性成分的快速鉴别。
引用
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页码:1873 / 1880
页数:8
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[2]   加工食品中若干动物成分的PCR检测技术应用研究 [J].
陈文炳 ;
邵碧英 ;
廖宪彪 ;
江树勋 ;
李寿崧 .
食品科学, 2005, (08) :338-342
[3]   通用引物多重PCR快速检测水中肠道病毒的研究 [J].
袁长青 ;
李君文 .
中国公共卫生, 1999, (09) :80-81
[4]   Quantitative detection of poultry meat adulteration with pork by a duplex PCR assay [J].
Soares, Sonia ;
Amaral, Joana S. ;
Mafra, Isabel ;
Oliveira, M. Beatriz P. P. .
MEAT SCIENCE, 2010, 85 (03) :531-536
[5]  
Species determination – Can we detect and quantify meat adulteration?[J] . Nicolai Z. Ballin,Finn K. Vogensen,Anders H. Karlsson.Meat Science . 2009 (2)
[6]   Development of an assay for rapid identification of meat from yak and cattle using polymerase chain reaction technique [J].
Yin, R. H. ;
Bai, W. L. ;
Wang, J. M. ;
Wu, C. D. ;
Dou, Q. L. ;
Yin, R. L. ;
He, J. B. ;
Luo, G. B. .
MEAT SCIENCE, 2009, 83 (01) :38-44
[7]   Meat species identification and Halal authentication analysis using mitochondrial DNA [J].
Murugaiah, Chandrika ;
Noor, Zainon Mohd ;
Mastakim, Maimunah ;
Bilung, Lesley Maurice ;
Selamat, Jinap ;
Radu, Son .
MEAT SCIENCE, 2009, 83 (01) :57-61
[8]   SYBR-Green real-time PCR approach for the detection and quantification of pig DNA in feedstuffs [J].
Martin, Irene ;
Garcia, Teresa ;
Fajardo, Violeta ;
Rojas, Maria ;
Pegels, Nicolette ;
Hernandez, Pablo E. ;
Gonzalez, Isabel ;
Martin, Rosario .
MEAT SCIENCE, 2009, 82 (02) :252-259
[9]   Identification of meat species by TaqMan-based real-time PCR assay [J].
Kesmen, Z. ;
Gulluce, A. ;
Sahin, F. ;
Yetim, H. .
MEAT SCIENCE, 2009, 82 (04) :444-449
[10]   Polymerase chain reaction assay for identification of chicken in meat and meat products [J].
Mane, B. G. ;
Mendiratta, S. K. ;
Tiwari, A. K. .
FOOD CHEMISTRY, 2009, 116 (03) :806-810