逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术同时检测水中多种肠道病毒

被引：13

作者：

张崇淼 ^{[1
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刘永军 ^{[1
]}

王晓昌 ^{[1
]}

薛小平 ^{[2
]}

机构：

[1] 西安建筑科技大学环境与市政工程学院

[2] 西北工业大学生命科学院

来源：

环境科学研究 | 2007年 / 03期

关键词：

肠道病毒; 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR); 通用引物; 同时检测; 水;

D O I：

10.13198/j.res.2007.03.139.zhangchm.024

中图分类号：

R373 [人体病毒学（致病病毒）];

学科分类号：

100103 ; 100705 ;

摘要：

建立了一种利用通用引物RT-PCR技术检测水中肠道病毒的方法.利用脊髓灰质炎病毒1～3型,柯萨奇病毒B3型作为参考病毒株,根据肠道病毒RNA5′非编码区中具有高度同源性的序列来设计通用引物.比较了M-MLV酶和AMV酶的逆转录效果,AMV酶能够成功地从地表水和生活污水中逆转录病毒RNA,更适于实际应用.对比研究了PCR过程中的退火温度,c(Mg2+)等因素对RT-PCR检测结果的影响,选择退火温度55℃,c(Mg2+)为2 mmol/L的反应条件,优化了RT-PCR检测方法.通过检测水样中接种的连续稀释的病毒,确定了该检测方法的灵敏度为38 CCID50.考察人工污染的地表水、污水、二级处理出水样品发现,检测灵敏度基本一致.该方法可应用在实际环境的肠道病毒检测中.

引用

页码：137 / 141

页数：5

共 6 条

[1] 环境水体中肠道病毒浓缩方法的比较 [J].