应用双向热循环消减SELEX技术筛选肺癌血清核酸适配体

被引:5
作者
袁红霞 [1 ]
陈聪盈 [2 ]
王鸣刚 [2 ]
孙文平 [1 ]
王维君 [1 ]
张蕾 [1 ]
翟蒙 [1 ]
廖世奇 [1 ]
机构
[1] 甘肃省医学科学研究院医学分子生物学研究中心
[2] 兰州理工大学生命科学与工程学院
关键词
环氧基化琼脂磁珠; 肺癌血清; 指数富集的配基进化技术; 核酸适配体;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.08.18
中图分类号
R734.2 [肺肿瘤];
学科分类号
100214 ;
摘要
肺癌是发病率和死亡率较高的恶性肿瘤。现阶段,用于肺癌早期诊断的血清肿瘤标志物因其特异性与敏感性均较低,严重影响肺癌的临床诊断和治疗。本文用双向热循环消减指数富集的配基进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,筛选肺癌和非癌血清标志物的核酸适配体,建立肺癌的检测方法,提高诊断和治疗效率。实验用环氧基琼脂磁珠为筛选介质,以非癌混合血清、肺癌混合血清作为双向靶标。应用热循环消减SELEX技术,经19轮筛选分别获得非癌和肺癌血清的特异性核酸适配体。通过高通量测序,得到40条非癌核酸适配体序列和41条肺癌核酸适配体序列。从肺癌与非癌血清特异性核酸适配体序列中分别挑选出高丰度的4条序列,合成后制成检测试剂,经临床血清验证,阳性率为90%。该检测方法检测灵敏度高,为肺癌的早期诊断和治疗提供了新的分子识别元件。
引用
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页数:9
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