α-鹅膏[蕈]毒环肽核酸适配体的筛选和结构分析

被引:7
作者
汪颖
乔璞
宋玉竹
张金阳
陈强
韩芹芹
机构
[1] 昆明理工大学生命科学与技术学院
关键词
α-鹅膏毒肽; SELEX筛选核酸适配体技术; 核酸适配体; 核苷酸;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.2016.12.10
中图分类号
Q789 [基因工程的应用];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
α-鹅膏[蕈]毒环肽(α-amanitin)是从致命鹅膏毒伞子实体中分离的多肽物质。本文采用配体指数富集系统进化(systemic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术,以α-鹅膏[蕈]毒环肽为靶蛋白,以亲和填料epoxy-activated sepharose 6B为筛选介质,从体外合成的随机单链DNA文库中筛选其核酸适配体。经过12轮筛选,将第12轮筛选产物克隆测序,对获得的12条核酸适配体进行分析。二级结构预测分析表明,茎环和口袋结构为主要的结构形式,提示其可能是核酸适配体与α-鹅膏[蕈]毒环肽特异性结合的基础。对得到的核酸适配体进行特异性和灵敏度检测,其中E06核酸适配体的特异性最好,为核酸适配体检测蘑菇中α-鹅膏[蕈]毒环肽的残留奠定了基础。
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