亚硝酸还原酶的分离纯化及其性质研究

被引:23
作者
刘萍
罗岩
张莹
杨艳
孙君社
倪元颖
机构
[1] 中国农业大学食品科学与营养工程学院
关键词
巨大芽孢杆菌; 亚硝酸还原酶; 分离纯化; 酶学性质;
D O I
暂无
中图分类号
Q814 [酶工程];
学科分类号
090105 [作物生产系统与生态工程];
摘要
经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Cellulose柱层析、SephadexG-75凝胶过滤层析,由巨大芽孢杆菌(B.megaterium MPF-906)分离纯化得到亚硝酸还原酶(nitrite reductase,NiR),分子量为35ku。NiR反应的最适温度和pH值分别为40℃和6.5。热稳定性较好,80℃保温4h后仍有50%的酶活力。在pH5.5~9.0均较稳定,残余酶活都在60%以上。Cu2+、Ba2+能提高酶活力;Mn2+、Pb2+对酶活力有明显抑制作用;Na+、Fe3+、Mg2+、Al3+对其有轻微抑制作用;Ca2+、Zn2+对酶活力影响不大。亚硝酸钠为底物,该酶的Km=8.6mmol/L,Vmax=4.1U/mg,该酶的适电子供体为抗坏血酸20mol/L、0.1mol/L的连二亚硫酸钠和0.075mol/L的草酸钠。
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