HCV非结构蛋白NS5A人源单链可变区抗体基因的筛选与鉴定

被引：7

作者：

成军

钟彦伟

施双双

刘妍

王刚

董菁

夏小兵

陈菊梅

机构：

[1] 解放军第医院传染病研究所基因治疗研究中心,解放军第医院传染病研究所基因治疗研究中心,解放军第医院传染病研究所基因治疗研究中心,解放军第医院传染病研究所基因治疗研究中心,解放军第医院传染病研究所基因治疗研究中心,解放军第医院传染病研究所基因治疗

来源：

中华实验和临床病毒学杂志 | 2001年 / 03期

关键词：

噬菌体展示技术; 肝炎病毒,丙型; 病毒非结构蛋白类; 亲和筛选; 噬菌体,抗体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

目的　筛选、鉴定抗丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS5A的人源单链可变区抗体(ScFv)的编码基因 ,为HCVNS5A蛋白质生物学功能的研究及抗HCV的基因治疗研究开辟新途径。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,以重组纯化的HCV非结构蛋白NS5A为固相抗原 ,从噬菌体单链可变区抗体半合成库中经过 5轮“吸附洗脱扩增”筛选过程 ,获得抗原结合活性和特异性较强的HCVNS5A人源单链可变区抗体基因片段的阳性克隆 ,并对其进行免疫检测及序列测定。结果　筛选得到的ScFv片段基因核苷酸序列为 789nt,编码由 2 62个氨基酸残基组成的多肽 ,具有典型的免疫球蛋白轻链和重链可变区的结构特点。基因编码产物具有HCVNS5A蛋白反应的免疫学活性和特异性。结论　利用噬菌体抗体库技术 ,成功获得了HCVNS5A人单链可变区抗体ScFv编码基因 ,并获得了可溶性单链抗体的表达

引用

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共 8 条

[1] 丙型肝炎病毒核心蛋白可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达 [J].