大蒜素联合美罗培南对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌的体外杀菌研究

目的探讨体外大蒜素与美罗培南联合对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌的杀菌作用。方法 (1)采用EDTA-Na2纸片复合法和改良三维实验对6株多耐药鲍曼不动杆菌产生β-内酰胺金属酶进行鉴定。(2)采用M-H肉汤法,确定大蒜素、美罗培南、大蒜素+美罗培南的MIC值,计算两药联用的FIC指数,K-B纸片法鉴定大蒜素对美罗培南抑菌作用的影响,微孔板生物检测法检测大蒜素、美罗培南及两药联用的抑菌率。(3)M-H肉汤法检测还原型谷胱甘肽对大蒜素抑菌作用的影响;检测不同浓度大蒜素作用后,细菌谷胱甘肽、抗超氧阴离子自由基和总巯基的变化。(4)改良三维实验和M-H肉汤法检测大蒜素对β-内酰胺金属酶分解碳青霉烯类抗生素作用的影响。结果 (1)经EDTA-Na2纸片复合法和改良三维实验对6株多耐药鲍曼不动杆菌产生β-内酰胺金属酶进行鉴定,均产生β-内酰胺金属酶。(2)大蒜素对6株耐碳青霉烯抗生素鲍曼不动杆菌的MIC值均为512μg/ml,美罗培南为128μg/ml。两种药物联用FIC值为0.25,大蒜素+美罗培南较两种药物单独使用,抑菌率明显提高。(3)0.3mg/ml还原型谷胱甘肽与不同浓度大蒜素联用后,抑菌率显著下降。大蒜素作用组较无大蒜素作用组及高浓度大蒜素作用组较低浓度大蒜素作用组细菌谷胱甘肽、抗超氧阴离子自由基、总巯基水平显著下降。(4)美罗培南+大蒜素+酶提取物组抑菌率较美罗培南+酶提取物组显著提高。结论大蒜素对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌抑制作用与其引起细菌体内氧化失衡有关;大蒜素与美罗培南联用对该细菌有协同作用,机制可能与大蒜素抑制β-内酰胺金属酶对美罗培南的分解作用有关。