基于胆汁酸代谢组学探讨芍药苷改善α-萘异硫氰酸酯诱导胆汁淤积的作用机制

目的 基于胆汁酸代谢组学及分子生物学探讨芍药苷调控胆汁酸改善胆汁淤积的作用及机制。方法 雄性SD大鼠连续7 d ig熊去氧胆酸（ursodesoxycholic acid,UDCA）或芍药苷，于实验第4天ig α-萘异硫氰酸酯（α-naphthylisothiocyanate,ANIT）建立胆汁淤积模型。通过血清生化指标、肝脏病理组织染色、胆汁酸体积流量明确芍药苷缓解胆汁淤积的药效学基础。收集大鼠胆汁进行胆汁酸代谢组学分析，收集肝脏检测法尼醇X受体（farnesoid X receptor,FXR）和胆酸盐外排泵（bile salt export pump,BSEP）表达。结果 药效学实验显示，与对照组比较，模型组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、γ-谷氨酰转移酶（γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT）、总胆汁酸（total bile acid,TBA）、总胆红素（total bilirubin,TBIL）和直接胆红素（direct bilirubin,DBIL）水平均显著升高（P<0.01）；给予芍药苷后，上述指标显著降低（P<0.01），且呈剂量相关性。同时芍药苷能够改善大鼠肝组织水肿和炎性浸润，减少汇管区胆管增生，抑制肝细胞脂肪变性。胆汁酸代谢组学结果显示，与对照组比较，模型组牛磺胆酸（taurocholate acid,TCA）、牛磺α鼠胆酸（tauro-α-muricholic acid sodium,TαMCA）、胆酸（cholic acid,CA）、牛磺熊脱氧胆酸（tauroursodeoxycholicacid,TUDCA）、甘氨熊脱氧胆酸（glycoursodeoxycholicacid,GUDCA）、甘氨鹅脱氧胆酸（glycochenodeoxycholic acid,GCDCA）、甘氨胆酸（glycocholic acid,GCA）、熊脱氧胆酸（ursodeoxycholic acid,UDCA-7S）、牛磺石胆酸（taurocholic acid,TLCA）、牛磺猪脱氧胆酸（taurohyodeoxycholic acid,THDCA）、甘氨猪胆酸（glycohyocholic acid,GHCA）、甘氨脱氧胆酸（glycodeoxycholic acid,GDCA）、甘氨猪脱氧胆酸（glycohyodeoxycholic acid,GHDCA）、甘氨石胆酸（glycolithocholic acid,GLCA）、熊胆酸（ursocholic acid,UCA）、牛磺脱氧胆酸（taurodeoxycholate acid,TDCA）含量明显降低（P<0.05、0.01），牛磺β鼠胆酸（tauro-β-muricholic acid sodium,TβMCA）含量显著升高（P<0.01）；上述胆汁酸含量在芍药苷干预后明显回调（P<0.05、0.01）。分子生物学验证结果显示模型组大鼠肝组织FXR和BSEP的m RNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.05、0.01），经芍药苷治疗后二者表达明显上调（P<0.05、0.01）。结论 芍药苷能够调节胆汁酸池组成，降低毒性胆汁酸含量，上调FXR和BSEP活性，恢复胆汁酸池稳态，改善ANIT诱导的胆汁淤积。