目的:本课题通过动物实验研究,来探讨激素性股骨头坏死兔模型的复制方法,通过观察骨碎补总黄酮对新西兰大白兔激素性股骨头坏死血钙、血磷、ALP、骨小梁面积比、空骨陷窝率及病理组织切片的影响,来阐明骨碎补总黄酮防治激素性股骨头坏死的作用机理,为临床应用中药提供理论依据。方法:实验采用新西兰大白兔24只(雄雌各半)作为研究对象,建立激素性股骨头坏死模型后,空白组和模型组每天给予6 m L生理盐水灌胃1次,连续灌胃8周,实验组每兔每日按35mg/kg给予骨碎补总黄酮溶液6g/L灌服,连续灌胃8周。干预8周后,实验组分别与模型组、空白组对照,通过对各组各项观察指标,即血钙、血磷、ALP、骨小梁面积比、空骨陷窝率及病理组织切片进行检测观察,探讨骨碎补总黄酮干预下激素性股骨头坏死ALP、血磷、血钙与成骨细胞转化活性的关系,并解剖出股骨头在光镜下切片观察骨碎补总黄酮干预后激素性股骨头坏死兔的骨小梁面积比及空骨陷窝率的变化情况,以确定骨碎补总黄酮防治激素性股骨头坏死的相关作用机理。结果:血钙、血磷含量的测定:空白组与模型组血钙、血磷相比,差异均有显著统计学意义(P<0.05),提示大剂量激素可使模型组家兔的血钙明显降低,血磷明显升高,导致骨细胞破坏溶解形成骨质疏松,进而导致股骨头坏死的发生。实验组与模型组血钙、血磷比较,差异均有显著性差异(P<0.05),实验组与空白组相比,差异无统计学意义(P<0.05),提示用骨碎补总黄酮干预后,血清Ca、血磷水平基本可以提高到正常水平,同时也证明骨碎补总黄酮有助于新骨的形成或钙化,抑制骨钙向血液转移,预防骨质疏松的发生。细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性的测定:模型组与空白组、实验组相比,ALP明显降低,差异均有显著性统计学意义(P<0.05),提示成骨细胞代谢降低,骨吸收增加;实验组与空白组比较,ALP活性无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。骨小梁面积比、空骨陷窝率:模型组与空白组、实验组比较,模型组骨小梁面积比处较低水平,组间差异均有统计学意义(P<0.05);实验组和空白组比较,两组细胞中骨小梁面积比均处于较高水平,组间差异无统计学意义(P<0.05)。模型组与空白组、实验组比较,模型组空骨陷窝率处于较高水平,组间差异均有统计学意义(P<0.05);实验组与空白组比较,两组空骨陷窝率均处于较低水平,组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:骨碎补总黄酮可以调控血钙、血磷含量,助于新骨的形成或钙化;改善碱性磷酸酶的活性,促进成骨细胞形成的作用;刺激骨小梁的生成,降低空骨陷窝率,减少骨细胞的破坏,最终实现防治激素性股骨头坏死的目的,为临床治疗本病提供理论依据。
