杠板归的化学成分及其生物活性研究

杠板归又名贯叶蓼,为蓼科蓼属植物杠板归的全草。杠板归分布较广,具有清热解毒、散结消肿、活血止痛、顺气解痉、收敛止泻、通经利尿等功效,用于治疗百日咳、扁桃体炎、带状疱疹皮炎、淋浊、疮疖毒、虫蛇咬伤等病症。现代药理研究表明,杠板归体具有抗癌活性,而对其化学成分的研究相对较少。为研究杠板归中的有效活性成分,本文主要对原料杠板归的化学成分进行系统地提取分离及纯化,从中共分离得到了8个单体化合物,并通过质谱、一维和二维核磁共振谱鉴定了它们的结构,其中有1个为新化合物,2个为首次从杠板归中分离得到,并对部分化合物单体进行了初步的活性研究。本文的主要实验结果如下： 1、杠板归石油醚萃取相采用正相硅胶柱色谱等方法进行了分离,从中分离得到了β-谷甾醇(β-Sitosterol,Ⅰ)。 2、杠板归乙酸乙酯萃取相采用正相硅胶柱色谱、RP-18柱色谱、sephadex LH-20和制备型HPLC等方法进行了分离,从中分离得到4个化合物,即化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ和化合物Ⅴ。通过ESI-MS、NMR图谱分析鉴定了它们的结构,分别为二十五烷酸(Pentacosanoic acid,Ⅱ)、3,4-二羟基苯甲酸(3,4-Dihydroxybenzoic acid,Ⅲ)、槲皮素(Quercetin,Ⅳ).8-羰基-松脂酚(8-oxo-pinoresinol,Ⅴ)。其中化合物V为新化合物。 3、杠板归正丁醇萃取相采用D101型大孔树脂分离,用水、25%、50%、75%和95%的乙醇溶液洗脱得到不同极性的组分：25%乙醇洗脱部分通过RP-18反向硅胶柱色谱分离得到化合物Ⅳ；50%乙醇洗脱部分通过sephadex LH-20分离得到化合物Ⅵ和化合物Ⅶ；而75%乙醇洗脱部分通过正相硅胶柱色谱、sephadex LH-20分离得到化合物Ⅳ和化合物Ⅷ。经过分析鉴定其结构分别为：槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸(quercetin-3-O-β-D-glucuronide,Ⅵ)、槲皮素-4'-O-β-D-葡萄糖醛酸(quercetin-4'-O-β-D-glucuronide,Ⅶ)和芦丁(Rutin,Ⅷ).化合物Ⅱ和Ⅶ为首次从杠板归中分离得到。 4、杠板归化学成分的生物活性研究 研究发现杠板归中黄酮类化合物具有较强的抗氧化能力,在低浓度(25.0μg／mL)下测得样品对DPPH自由基的清除能力较高,DPPH自由基的清除率可达80%以上；并对黄酮类化合物的结构与其抗氧化活性的关系进行了探讨。 利用MTT法测定了化合物Ⅳ和Ⅴ的体外抗肿瘤活性,化合物Ⅳ对人前列腺癌PC3细胞具有较好的的抑制作用,IC50=46.6±6.3μg/mL；化合物V人前列腺癌PC3细胞及人肝癌SMMC-7721细胞均具有较好的体外增殖抑制作用,其中对于人肝癌SMMC-7721细胞的体外增殖抑制作用明显好于对人前列腺癌PC3细胞的抑制作用,IC50分别为80.0±13.1μg／mL和35.5±11.5μg／mL。 此外,论文还对近年来蓼属植物的化学成分研究进行了综述,本实验对杠板归化学成分进一步的研究及物质的生物活性提供技术支持和科学依据。