沙生蜡菊和蓝刺头地上部分的化学成分及生物活性研究

本研究论文对两种药用植物的化学成分及其生物活性进行了系统研究。 1.沙生蜡菊[Helichrysum arenarium(L.)Moench]为菊科蜡菊属植物,主要分布于我国的新疆及国外的俄罗斯、蒙古及欧洲一些国家。在欧洲,沙生蜡菊为传统的植物药,主要作为保肝利胆剂,并具较好的解毒功效,现代药理学研究证明,沙生蜡菊还具有抗氧化、抗菌的作用;以前报道其化学成分主要为黄酮和酚酸类化合物。 对沙生蜡菊(H.arenarium)全草的70%乙醇提取物用溶剂分步萃取法和硅胶柱色谱、制备薄层色谱、聚酰胺色谱、开口ODS柱色谱、高效液相色谱、SephadexLH-20柱色谱及重结晶等分离纯化手段,得到41个化合物。通过理化常数、化学方法及波谱数据(UV、IR、NMR、MS)分析等,鉴定了它们的结构,其中包括19个黄酮类、12个有机酚酸及其酯类、2个异苯并呋喃-1(3H)-酮类、1个香豆素类、1个吡喃-2-酮类及6个其它类成分。 已鉴定的化合物分别为:芹菜素(apigenin,1),芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside,2),山柰酚(kaempferol,3),山柰酚-3-O-β-吡哺葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside,4),山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempferol-7-D-β-D-glucopyranoside,5),山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(kaempferol-7-O-α-L-rhamnoside,6),木樨草素(luteolin,7),木樨草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside,8),槲皮素(quercetin,9),槲皮苷(quercitrin,10),芦丁(rutin,11),柚皮素(naringenin,12),鹰嘴豆芽素(5-hydroxy-4'-methoxyisoflavone,13),绛紫香苷(5-hydroxy-4'-methoxyisoflavone-7-O-β-D-glucopyranoside,14),6,8-二甲氧基-3,5,7-三羟基黄酮(6,8-dimethoxy-3,5,7-trihydroxyflavone,15),3,5-二羟基-6,7,8-三甲氧基黄酮(3,5-dihydroxy-6,7,8-trimethoxyflavone,16),5,6,4'-三羟基黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5,6,4'-trihydroxyflavone-7-O-β-D-glucopyranoside,17),5,4'-二羟基-6,7,3',5'-四甲氧基黄酮(5,4'-dihydroxy-6,7,3',5'-tetramethoxyflavone,18),5,7,4'-三羟基-8-甲氧基黄酮(5,7,4'-trihydroxy-8-methoxyflavone,19),4-羟基-6,7-二甲氧基-1-萘酸(6,7-dimethoxy-4-hydroxy-1-naphthoic acid,20),咖啡酸(caffeic acid,21),咖啡酸甲酯(methyl caffeate,22),原儿茶酸(protocatechuic acid,23),对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid,24),熊果苷(arbutin,25),异香草酸(isovanillic acid,26),没食子酸(gallic acid,27),奎宁酸(quininic acid,28),奎尼酸甲酯(methyl quinic ester,29),绿原酸(caffeotannic acid,30),1,3-O-二咖啡酰基奎尼酸(1,3-O-dicaffeoylquinic acid,31),(Z)-5-hydroxy-7-methoxy-4-[3-methyl-4-(O-β-D-xylopyranosyl)but-2-enyl]isobenzofuran-1(3H)-one(32),5-hydroxy-7-O-β-D-glucopyranosyl-isobenzofuran-1(3H)-one(33),东莨菪内酯(scopoletin,34),6-(4'-hydroxy-trans-styryl)-4-methoxy-2-pyrone(35),鲨肌醇(scyllo-inositol,36),白桦酸(betulic acid,37),齐墩果酸(oleanolic acid,38),熊果酸(ursolic acid,39),β-谷甾醇(β-sitosterol,40),胡萝卜苷(daucosterol,41)。其中化合物20,32为未见文献报道的新化合物,化合物6,13,14,17,18,26,29,33,37为首次从本属植物中分离得到。 对沙生蜡菊提取物、萃取层及单体化合物做了抗菌、体外抗肿瘤及抗炎三方面的活性筛选。 利用文献,针对具有抗肿瘤和抗菌消炎作用的活性天然产物,在其结构修饰及人工合成方面的研究进展做了综述。 2.蓝刺头(Echinops latifolius Tausch)又名火球花,为菊科蓝刺头属植物,多年生草本,分布于我国黑龙江、吉林、辽宁、河北、河南、山西、内蒙古、江苏及湖北等地。药用其根,为中药禹州漏芦所属的二种基源植物之一,其味苦,性寒,入胃经。禹州漏芦中含有噻吩、三萜、挥发油等化学成分,具有抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、抗炎及保肝作用等活性。 目前,对蓝刺头地上部分的化学成分及药理活性的研究报道很少,为寻找新的活性成分,扩大药用部位,我们决定对蓝刺头地上部分(包括茎叶和花)进行系统的化学成分研究。 本文对蓝刺头(E latifolius)地上部分的95%乙醇提取物化学成分进行了系统研究,利用硅胶吸附柱色谱、制备薄层、Sephadex LH-20柱色谱等分离手段,从蓝刺头地上部分得到14个化合物。通过理化性质、化学反应以及波谱方法鉴定了它们的结构,分别为:β-谷甾醇(β-sitosterol,1),蓝刺头碱(echinopsine,2),蒲公英萜醇乙酸酯(taraxerol acetate,3),胡萝卜苷(daucosterol,4),α-三联噻吩(α-terthienyl,5),5-(丁烯-3-炔-1)-联噻吩[5-(but-3-en-1-ynyl)-2,2'-bithiophene,6],木栓酮(fredelin,7),卡多帕亭(cardopatine,8),异卡多帕亭(isocardopatine,9),羽扇豆醇(lupeol,10),5-乙酰基-2,2'-联噻吩(5-acetyl-2,2'-bithiophene,11),4,6,8(14),22(E)-四烯-3-酮-麦角甾[ergosta-4,6,8(14),22(E)-tetraen-3-one,12],丁二酸(succinic acid,13),5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfuraldehyde,14)。其中化合物7、12为首次从蓝刺头属植物中分离得到,也首次从该植物的地上部分分离得到噻吩类成分。 利用人类慢性骨髓性白血病K562细胞模型,以细胞周期抑制和细胞凋亡诱导活性为筛选指标,对蓝刺头地上部分95%乙醇提取物各萃取部分及70%乙醇提取物进行活性筛选,确定其抗癌活性成分集中于95%乙醇提取物的石油醚萃取部分及氯仿萃取部分。 采用MTT法和SRB法,对分离得到的噻吩类成分的体外肿瘤抑制活性进行了初步研究。研究发现测试化合物均显示出光敏活性,对试验细胞系具有明显的依赖于长波紫外光的细胞毒作用。