黄芪总黄酮对大鼠佐剂性关节炎OPG/RANKL/NF-κB通路调控研究

本实验采用弗氏完全佐剂建立大鼠佐剂性关节炎(AA)模型,探究黄芪总黄酮(TFA)对AA的抗炎作用及其机理。取42只大鼠随机分为6组,空白组、模型组、阳性组(MTX3mg/kg)及黄芪总黄酮高、中、低剂量组(TFA 100mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg),除空白组外,其余组大鼠右后足趾皮内注射卡介苗浓度为1 Omg/ml的弗氏完全佐剂0.1 ml建立AA模型。次日,各组灌胃相应药物,连续28 d。灌胃同时每4d测一次大鼠体重及原发足趾肿胀度,16d后每2d观察关节炎指数,第29 d心脏取血,分离血清,ELISA法测定血清中IL-1β、TNF-α、PGE2、OPG、RANKL的含量及计算OPG/RANKL。摘取脾脏和胸腺,计算脾脏指数和胸腺指数,HE染色观察大鼠踝关节滑膜组织及软骨组织的结构变化并进行组织病理学评分。免疫组化法观察大鼠滑膜细胞NF-κB p65的表达。结果显示,TFA 100 mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg剂量组均能在一定程度上降低AA大鼠原发足趾肿胀度及多发性关节炎指数,下调异常升高的脾脏指数和胸腺指数,同时增加AA大鼠的体重。ELISA法检测显示：模型组大鼠血清中IL-1β、TNF-α、PGE2、RANKL明显升高,OPG含量明显降低。TFA 100 mg/kg、 50 mg/kg、25 mg/kg剂量组均能不同程度的下调AA大鼠血清IL-1β、TNF-α、 PGE2、RANKL的分泌并上调血清中OPG的分泌及OPG/RANKL。 HE染色显示：TFA 100 mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg剂量组均可减轻AA大鼠踝关节炎性细胞浸润及滑膜增生、减少血管翳生成。免疫组化显示：模型组滑膜细胞NF-κBp65高表达,TFA 100 mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg剂量组均能抑制NF-κB p65的高表达。研究表明,TFA能降低AA大鼠原发足趾肿胀度及多发性关节炎指数,下调异常升高的脾脏指数和胸腺指数,同时增加AA大鼠的体重,使AA大鼠关节异常形态结构得以恢复,降低AA大鼠滑膜组织中NF-κB p65蛋白表达,降低AA大鼠血清中过高分泌的IL-1β、TNF-α、PGE2、RANKL,促进血清中OPG的分泌及上调OPG/RANKL.上述改变可能是TFA治疗大鼠AA的机制之一。