背景近年来,随着人民生活水平的不断提高,人们的饮食结构在改变,高脂、甜食、酒精在人类饮食中所占比重越来越大,我国脂肪肝呈逐年上升趋势,严重威胁人们的健康。因此,寻找有效、安全的药物来防治酒精性肝损伤变得极为重要。
实验研究表明,大黄素(Emodin,EMO)具有多种药理学活性,例如抗炎、抑菌、抗病毒、抗氧化、抑制胰酶、保肝肾、抗肿瘤等。大黄素是中药大黄的有效成分之一,与大黄的药理作用相似。大黄作为一种传统中药已经广泛应用于临床,主要用于治疗黄疸、急性胰腺炎等。随着逐渐深入对大黄素药理作用的研究,其应用于临床的前景将更为广阔。
但是,大黄素本身几乎不溶于水,在肠内易于吸收,生物利用度低,因此需研制高效、强效大黄素新剂型使之溶解度增加,提高其分散性,进而提高其体内生物利用度,为其更好的应用于临床奠定基础。目的将大黄素制备成固体分散体,以提高大黄素的溶解度及体外溶出度,在建立实验性酒精肝损伤模型大鼠的基础上,将大黄素及大黄素固体分散体分别应用于大鼠模型上,研究比较大黄素及其固体分散体对大鼠酒精性肝损伤的影响,探讨大黄素固体分散体是否可以更有效发挥抗氧化作用,清除自由基,减轻酒精对肝脏的损伤作用,为临床研发药物新剂型奠定了实验基础。
方法
筛选大黄素固体分散体的最佳制备方案:首先以两种不同水溶性高分子材料PVPk30和PEG6000为载体,分别制备三种不同质量比例(1:2、1:4、1:6)的大黄素固体分散体。通过含量测定选出最佳载体;再通过溶解度测定和体外溶出度测定选出最佳比例,从而确定大黄素固体分散体的最佳制备方案,在对确定的大黄素固体分散体的性质通过差示热扫描、红外光谱扫描及在不同PH值环境下的稳定性进行研究。
药效学:
以健康的SPF级雄性SD大鼠为实验对象,适应性饲养1周,随机分为5组,每组5只,包括:酒精性肝损伤模型组、大黄素给药组(EMO)、大黄素固体分散体低剂量给药组(E-SDL)、大黄素固体分散体高剂量给药组(E-SDH),同时设立空白对照组。上午:空白对照组:喂食普通饲料;酒精性肝损伤模型组、EMO组、E-SDL组和E-SDH组:灌胃给予酒脂乳剂10 ml/kg/d;下午:空白对照组、酒精性肝损伤模型组分别灌胃给予1.5 %羟甲基纤维素钠溶液;EMO组给予大黄素40 mg/kg/d;E-SDL组给予大黄素固体分散体40 mg/kg/d;E-SDH组给予大黄素固体分散体80 mg/kg/d。以上5组每日给药一次,连续8周。每周称重大鼠1次,根据体重调整给药量,直至实验结束。
末次给药后,所有动物均禁食12 h。五组大鼠称重,心脏取血并分离血清,取动物肝脏,制备组织匀浆;计算肝指数,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、超氧化物歧化酶(SOD)。大鼠解剖以后肉眼观察肝脏形态,HE染色观察肝组织病理学变化。
利用Excel处理数据,实验数据用x±s表示。采用SPSS17.0统计学软件one-way ANOVA单因素方差分析法分析数据。
结果大黄素固体分散体体外溶出实验表明:大黄素制备成固体分散体后,溶解度及溶出度都显著增加。经差示热扫描和红外光谱扫描鉴定固体分散体的存在;经测定,证实大黄素固体分散体在不同PH值环境下8 h内基本稳定。
大黄素固体分散体对大鼠酒精性肝损伤的试验研究表明:大黄素固体分散体能显著降低酒精性肝损伤大鼠血清中和肝匀浆中甘油三脂(TG)和总胆固醇(TC)含量并降低血清和肝匀浆中谷草氨酸氨基转移酶(AST)和谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;既可降低肝组织中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,并可以提高肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性;另外,还可升高还原型谷胱甘肽(GSH)含量,降低血清中γ-GT活性。
与空白对照组相比,模型组大鼠TG和TC含量明显增加(P < 0.05),说明酒精性肝损伤大鼠模型成功建立。与模型组相比,E-SDL和E-SDH组能显著降低大鼠血脂水平(P < 0.05)。
与空白对照组相比,模型组大鼠AST、ALT活性和肝指数显著上升(P < 0.05),说明酒精性肝损伤大鼠肝脏受损。与模型组相比,EMO组及E-SDL和E-SDH组能够明显降低AST和ALT活性及肝指数(P < 0.05),并且剂量增加保护肝脏的程度增强。
与空白对照组相比,模型组大鼠GSH、γ-GT含量降低(P < 0.05),说明肝脏受损。与模型组比较,EMO组及E-SDL和E-SDH组能够使GSH含量升高、γ-GT活性降低(P < 0.05)。
结论利用水溶性高分子材料PVPk30为载体,以大黄素与PVPk30质量比为1:2的比例,将大黄素制备成固体分散体,成功的提高了药物大黄素的分散性,克服了大黄素水溶性低的问题。
大黄素固体分散体对实验性酒精性肝损伤大鼠的保肝及抗氧化作用明显,并且作用效果优于纯大黄素;大黄素固体分散体在发挥药理作用时呈现出一定程度的量效关系;另大黄素毒副作用小,对肝脏起到一定程度的保护作用。
