甘薯藤活性多糖的分离、纯化及功能研究

本文以徐薯18甘薯藤为材料,对采用中试设备提取出的甘薯藤多糖进行研究。研究内容包括甘薯藤多糖的分离与纯化、对自由基的清除和抑制脂质过氧化作用、对SD大鼠的抗动脉粥样硬化及对小白鼠的抗疲劳作用。 中试设备提取出的多糖溶液经浓缩、乙醇沉淀、Sevage法脱蛋白,通过正交实验确定活性炭脱色的最佳条件为:60℃、20min、0.5%活性炭用量,再透析,制备出甘薯藤多糖（PSPV,Polysaccharides from Sweet Potato Vines）溶液。PSPV经DEAE—纤维素柱分离,在0.2mol/l NaCl洗脱条件下,得一级分PSPV Ⅰ,通过高效液相色谱检测分析为单一多糖组分,分子量为:6.278×10～4。 利用PSPV Ⅰ为实验材料进行自由基的清除和抑制脂质过氧化实验。用氮蓝四唑（NBT）光还原法测定PSPV Ⅰ对O2?的清除率,氧化还原法测定对·OH的清除率,硫代巴比妥酸（TBA）法测定对亚油酸的抗氧化性。实验表明,PSPV Ⅰ对O2?、·OH清除率达到最高为67.18%、63.86%,百分之五十抑制浓度IC50为4.8μg/ml、4.4μg/ml,0.2%PSPV Ⅰ对亚油酸的抗氧化效果与0.01%BHT相当。 不同浓度PSPV灌胃高脂血症SD大鼠模型,实验持续8w,每2w采血一次,测定血清中总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的浓度,通过公式计算血清高密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和动脉硬化系数（AI）。结果表明:PSPV能极显著降低高脂血症大鼠血清中TC、TG、LDL-C含量和AI,提高HDL-C含量,灌胃600mg/kg/d、400mg/kg/d、200mg/kg/d PSPV组AI为灌胃0.9%生理盐水正常组的1/3.3、1/3.7、 1/1.5。同时PSPV能极显著降低受试动物肝脏粗脂肪含量,并对脂肪肝有显著的预防和疗效。 设计抗疲劳游泳实验,灌胃200mg/kg/d、400mg/kg/d、600mg/kg/d PSPV组比灌胃0.9%生理盐水正常组小鼠游泳时间分别增加了10.3%、29.2%、60.4%,运动后血尿素氮含量减少1.2%、4.8%、8.4%,且乳酸脱氢酶活力极显著升高。