酵母菌对柑橘采后病害的生物防治及防治机理的研究

柑橘营养丰富，深受广大消费者欢迎，为世界上产量最大的水果。但柑橘绿霉病是柑橘果实采后贮藏运输期间发生最普遍、最严重的病害，给生产造成巨大损失。长期以来一直使用化学杀菌剂来防治柑橘的腐烂，但会造成农药残留、环境污染、危害人体健康以及病原菌产生抗药性等一系列问题。目前，用酵母菌对果实采后病害的生物防治越来越引起人们的重视。 本研究从柑橘果实表面和健叶上分离、筛选到对柑橘绿霉病有很好抑制效果的酵母菌2株，经初步鉴定分别属于假丝酵母属(Candida sp．)和类酵母属(Saccharomycodes sp．)。主要探讨了这两个菌株的生长条件优化、最佳培养基配方、生物防治效果以及抑菌机理。主要取得了如下的研究成果： 1、Candida sp．的生长最优化条件应为培养基为NYDB、培养温度24℃、培养时间48h、pH值6.0和装液量100ml／250ml；Saccharomycodes sp．的生长最优化条件应为培养基NYDB、培养温度28℃、pH值4.0、装液量50ml／250ml和培养时间72h。 2、不同的氮源与不同的碳源对拮抗菌Candida sp．生长的影响是不同的。Candida sp．能够利用的氮源和碳源都很广泛。尤以酵母提取物作为氮源、葡萄糖作为碳源时，Candida sp．的生长效果是最好的，且氮源对于酵母菌生长的影响远远大于碳源的影响。 3、拮抗酵母菌的浓度越高对柑橘绿霉病的抑制效果越好，1×10～8CFU／mL的酵母菌浓度就能够很好的抑制柑橘绿霉病的发生。 4、拮抗酵母菌与病原菌的不同接种时间与生物防治效果有关。将拮抗酵母菌先于指状青霉菌接种时，对柑橘绿霉病的生防效果显著好于同时接种的。 5、拮抗酵母菌Candida sp．在PDA平板上能够抑制指状青霉孢子的萌发，对菌丝的生长也有一定的影响。当Candida sp．的菌悬浮液浓度为1×10～8CFU／mL时，24h内就能完全抑制病原菌孢子的萌发。 6、拮抗酵母菌Candida sp．和Saccharomycodes sp．在柑橘果皮上具有很好的定殖能力。接种酵母菌1d时，其含量就已经是当日接种的10倍；在3d时菌株Candida sp．的数量达到最大值，是当日接种的26.2倍；4d时菌株Saccharomycodes sp．的数量达到最大值，是当日接种的55.7倍，并且能够维持较长的时间。 7、当采用1×10～8CFU／mL的酵母菌Candida sp．和Saccharomycodes sp．浸泡柑橘果实后发现：柑橘果皮的PAL(苯丙氨酸解氨酶)、POD(过氧化物酶)显著升高，PPO(多酚氧化酶)显著降低；在柑橘果实的伤口处添加Penicillium digitatum的孢子悬浮液可以显著诱导柑橘产生β-1，3-葡聚糖酶和几丁质酶。