广西茉莉花叶黄酮类化合物抗氧化活性及其构效关系和作用机理研究

目的:本实验以广西茉莉花叶为研究对象,对其中的黄酮类化合物进行提取和分离,明确广西茉莉花叶中黄酮类化合物的抗氧化活性,阐明茉莉花叶黄酮类化合物抗氧化活性及其构效关系和作用机理。方法:广西茉莉花叶用95%乙醇浸渍法提取,减压浓缩得乙醇提取物浸膏M1分两部分:一部分依次经石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取并减压浓缩得石油醚浸膏M2、氯仿浸膏M3、乙酸乙酯浸膏M4;另一部分经索氏回流提取后,经减压浓缩得M5浸膏,分别用AB-8和H103两种大孔吸附树脂富集分离分别得富集物M6和富集物M7。用紫外分分光光度法测定各部位总黄酮含量,通过HPLC确定分离条件,选择AB-8大孔吸附树脂结合制备液相色谱技术对总黄酮进行单体分离纯化,通过现代波谱和光谱技术对黄酮单体进行结构鉴定。对黄酮单体化合物进行清除DPPH、O2-·、·OH等自由基、还原Fe3+、与Fe2+螯合以及对DNA间接损伤的保护作用展开研究,并探讨抗氧化活性构效关系和作用机理。结果:用分光光度法,以芦丁为标准品,绘制标准曲线:回归方程为y(吸光度)=10.633x(浓度mg/ml)-0.0008,R2=0.9995。再对浸膏M1、M2、M3、M4、M6、M7进行总黄酮含量测定,得到总黄酮含量是:M1(0.0743 g/g)、M2(0.0993 g/g)、M3(0.2306 g/g)、M4(0.2149g/g)、M6(0.2943 g/g)、M7(0.2495 g/g)。从茉莉花叶分离得到五种黄酮类化合物单体:化合物1为槲皮素-3-O-(2,6-α-L-二吡喃鼠李糖基)-β-D-吡喃半乳糖苷、化合物2为毛里求斯排草素、化合物3为山奈酚-3-β-刺槐糖苷、化合物4为槲皮素-3-β-刺槐糖苷和化合物5为烟花苷。在抗氧化活性方面的实验,五种黄酮化合物单体对清除DPPH、O2-·、·OH等自由基、还原Fe3+、与Fe2+螯合以及对DNA间接损伤的保护作用都表现出了较好的抗氧化活性,而且抗氧化能力和其剂量呈正相关关系。五种黄酮化合物单体抗氧化活性构效关系主要含有以下几点:酚羟基的取代数目和位置;C-2,3位的双键;羟基的苷化;化合物的空间结构等。作用机理:是通过抑制和清除自由基的活性来避免氧化损伤。结论:本课题从广西茉莉花叶分离得到五种黄酮化合物单体,五种黄酮化合物单体均具有较好的抗氧化活性,并且探讨了其构效关系和作用机理,为进一步研究黄酮类化合物的结构修饰和合成、发现先导化合物,以及茉莉花叶的药理活性与深入开发奠定基础。