加减元滑苓甘散对急性药物性肝损伤小鼠GSH和TNF-α的影响研究

目的：本课题通过科学、规范的动物实验来观察加减元滑苓甘散对对乙酰氨基酚(APAP)所致急性药物性肝损伤小鼠的谷胱甘肽(GSH),肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响,来阐释加减元滑苓甘散对肝损伤的保护作用,并对其发病机制进行探讨,为中医药治疗本病提供理论依据。方法：60只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级昆明小鼠,体重18-20g。适应性喂养7天后,根据随机数字表将小鼠分为6组,即：空白组,模型组,硫普罗宁组,加减元滑苓甘散高、中、低剂量组,每组10只。空白组、模型组小鼠连续14天给予生理盐水灌胃；硫普罗宁组以硫普罗宁溶液0.075g/kg/d给小鼠灌胃14天；高、中、低剂量组分别按照24.4g/kg/d、 12.2g/kg/d、6.10g/kg/d连续14天给小鼠灌胃。每日上午10点灌胃1次。末次灌胃2h后,空白组给予生理盐水灌胃,模型组、高、中、低剂量组以APAP500mg/kg一次性给小鼠腹腔注射给药。4小时后,所有小鼠眼球取血取肝组织,分别检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、GSH、TNF-α及肝组织病理形态学变化。结果：(1)肝功各项：模型组小鼠与空白组相比肝酶显著升高；与模型组相比,其他各组小鼠血清ALT、AST、ALP活性显著降低,具有显著统计学意义(P<0.01),其中加减元滑苓甘散高剂量组降低最为明显；(2)GSH：模型组明显降低,与空白组比较具有显著统计学意义(P<0.01),其他各给药组GSH水平均有升高,尤以高剂量组升高最为明显,具有显著统计学意义(P<0.01);(3)TNF-α:模型组与空白组相比明显升高,比较具有显著统计学意义(P<0.01),其他各给药组TNF-α水平均有降低,其中高剂量组降低最为明显,具有显著统计学意义(P<0.01)；(4)肝脏病理：根据光镜观察小鼠肝脏得出,模型组小鼠肝组织病理改变明显,其他各给药组与模型组比较均减轻,尤以高剂量组减轻显著。结论：(1)加减元滑苓甘散能对抗APAP诱导的小鼠肝损伤模型,并能抑制TNF-α表达,增加GSH水平；(2)TNF-α水平增高是导致小鼠急性肝损伤的重要因素；(3)加减元滑苓甘散的保肝作用可能是通过升高体内GSH水平,抑制TNF-α的表达,从而对抗氧自由基,改善炎症反应,从而减轻肝细胞变性、坏死来实现。