由于抗生素作为饲料添加剂带来的种种不利因素,寻找新型可替代的饲料添加剂迫在眉睫。小刺猴头菌发酵浸膏多糖(HFP)是一种天然无毒的真菌多糖。大量的科学研究证明,小刺猴头菌多糖具有抗肿瘤,抗病毒,抗菌等功效。本实验选取240只1日龄健康且生产性能相近的艾维茵肉仔鸡,随机分为4组,每组3个重复,每个重复20只。选用无任何抗生素的玉米-豆粕型饲粮作为基础饲粮,各试验组分别在基础饲粮中添加0、0.1%、0.3%和0.5%小刺猴头菌发酵浸膏多糖,试验期42天。从生产性能、肠道pH值、肠道菌群数量、盲肠短链脂肪酸的含量及菌群结构的变化,研究分析了在肉仔鸡的饲粮中添加不同含量的小刺猴头菌发酵浸膏多糖对肉仔鸡肠道菌群的影响,为以后在生产上应用该多糖提供试验依据。
结果表明:
1.小刺猴头发酵浸膏多糖在一定程度上可促进肉仔鸡的生产性能。0.1%HFP对肉仔鸡的平均日增重、平均日采食量及料肉比的影响无显著性的影响。0.3%HFP在一定程度上降低了平均日增重、平均日采食量,实验前期料肉比显著低于空白组(P<0.05),后期与空白组相比差异不明显。0.5%HFP在一定程度上能够促进肉仔鸡平均日增重的增长,降低料肉比。
2.0.1%HFP组可极显著降低14日龄肉仔鸡回肠pH值(P<0.01)。0.3%HFP组可显著降低21日龄肉仔鸡盲肠pH值和28日龄回肠pH值(P<0.05),0.5%HFP组可显著降低肉仔鸡盲肠(21日龄)pH值、回肠(28日龄)pH值(P<0.05),极显著降低了42日龄肉仔鸡盲肠pH和14日龄肉仔鸡回肠pH(P<0.01)。2)0.1%,0.3%,0.5%HFP组显著提高肉仔鸡的回盲肠乳酸杆菌与双歧杆菌的数量(P<0.05),降低肠道内大肠杆菌,沙门氏菌和肠球菌的数量,尤以0.5%HFP组的效果最好。
3.在肉仔鸡饲粮中添加HFP能增加盲肠中乙酸、丙酸、丁酸的浓度。28日龄时,与空白组相比,0.1%HFP组盲肠乙酸的浓度差异显著(P<0.05);0.1%、0.5%HFP组盲肠丙酸的浓度差异显著(P<0.05);0.1%HFP组盲肠丁酸浓度较空白组差异极显著(P<0.01)。当肉仔鸡达到42日龄时,与空白组相比,0.1%HFP组盲肠丙酸浓度达到显著差异(P<0.05),0.5%HFP组盲肠丙酸浓度达到极显著差异(P<0.01);0.1%HFP组盲肠丁酸浓度差异显著(P<0.05),而0.5%HFP组盲肠丁酸浓度差异极显著(P<0.01)。
4.通过对ERIC-PCR反应体系中各因素进行单因素实验和正交试验,建立了适合肉仔鸡肠道ERIC-PCR扩增条件。最佳扩增体系为:10×buffer2.5μL,dNTPs浓度0.2mmol/L,Mg2+浓度2.5mmol/L,模板52.5ng,引物14.5pmol,Taq酶2.5U,不足25gL的体系用ddH2O补足。最佳扩增程序为:①95℃预变性7min;②94℃变性1min,52℃复性lmin,65℃延伸8min,此过程进行30个循环;③65℃延伸10min。
5.通过对比空白组与HFP组(0.1%、0.3%、0.5%)的14、21、28、42日龄肉仔鸡回盲肠样本DNA的ERIC-PCR指纹图谱发现,空白组与HFP组的回盲肠的肠道菌群结构存在较大差异,特异性条带明显多于空白组,饲喂HFP的实验组菌群结构较为丰富,鸡群健康,更利于调节肠道内环境的平衡。