赶黄草又名扯根菜,为虎耳草科扯根菜属多年生草本植物,具有清热解毒、退黄化湿、活血化瘀、利水消肿之功效。现代研究表明,赶黄草在保肝护肝方面具有良好的效果。市售成品主要是由其粗提物制成的中成药颗粒剂或胶囊剂,对赶黄草的研究和开发尚处于初级阶段,因此,对赶黄草的药效物质基础、药理作用机制和成分分析的研究非常必要。本文首先以赶黄草中总黄酮为指标,采用正交设计法,优化并对比了回流提取法、微波提取法、超声提取法和冷浸提取法对总黄酮的提取率,研究知回流提取法比其他三种方法对总黄酮的提取率高,且最佳回流提取工艺为65%乙醇,料液比1:20提取1 h。随后又对赶黄草进行了系统分离,实验采用硅胶色谱柱、ODS-C18反相色谱柱、葡聚糖凝胶、半制备液相色谱等现代色谱分离技术,运用紫外、质谱、核磁等波谱分析技术共分离鉴定了21个化合物,分别是:没食子酸(gallic acid),原儿茶酸(protocatechuic acid),2,6-二羟基苯乙酮-4-O-β-D葡萄糖苷(2,6-dihydroxyacetophenone-4-O-β-D-glucoside),儿茶素(catechin),芦丁(rutin),槲皮素(quercetin),槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷(quercetin-3-O-α-L-arabinfuranoside),槲皮素-3-O-β-D鼠李糖苷(quercetin-3-O-β-D-rhamnoside),乔松素苷(pinocembrin-7-O-glucoside),山奈酚-3-O-阿拉伯糖苷(kaempferol-3-O-α-L-arabinfuranoside),2',4',6'-trihydroydihydrochalcon-4'-β-D-glucoside,柚皮苷(naringenin-7-O-glucoside),pinocembrin-7-O-[4'',6''-hexahydroxydiphenoyl]-β-glucose,PGHG(pinocembrin'-7-O-[3''-O-galloyl-4'',6''-hexahydroxydiphenoyl]-β-glucose),芹菜素(apigenin),thonningianins B,thonningianins A,木犀草素(luteolin),Scutellarin-7-O-rhamnoside,β-谷甾醇(β-sitosterol),β-胡萝卜苷(β-daucosterol)。另外,本研究还通过SMMC-7721肝癌细胞模型评价了不同单体的肿瘤抑制率,结果显示没食子酸、PGHG、Thonningianins A、Pinocembrin-7-O-HHDP-β-glucose、Thonningianins B等鞣花黄酮类成分是赶黄草中保肝护肝的药效物质基础,IC50值分别为36.52、38.66、43.25、74.65和62.24μg/mL。最后,本课题又对不同产地和不同采收季的赶黄草中17个主要活性成分进行了含量测定和指纹图谱研究,并监测了不同采收期赶黄草花和茎中主要活性成分的含量变化,为赶黄草的质量控制评价提供了一定的理论依据。
