大豆抗氧化肽的分离及其生物活性研究

研究表明生物体许多慢性疾病及衰老现象均与体内自由基水平失衡有关，过量的自由基可对机体产生氧化性损伤，当这种损伤不能及时修复并且积累到一定程度时就会导致疾病的发生。外源性抗氧化剂可以帮助机体维持体内自由基的平衡。通过对具有抗氧化活性的天然物质进行研究、筛选和分离纯化有可能开发出非常有效的抗氧化添加剂和保健食品。近年来的研究发现大豆蛋白酶解物具有很高的抗氧化活性，而且我国大豆产量大、价格低廉，因此研究开发抗氧化大豆肽具有重要的社会意义和经济价值。本研究针对大豆蛋白酶解物的分离、大豆肽的组成及抗氧化活性进行了一系列的分析研究，旨在为抗氧化大豆肽的进一步开发利用提供科学依据。本研究具体包括以下三个方面： 1．大豆抗氧化肽的分离及其组成研究 采用sephadex G-25凝胶过滤层析对大豆蛋白酶解物进行初步分离，采用亚油酸-硫氰酸铁法和茚三酮法分别研究大豆肽各分离组分的抗氧化活性和分子量分布，并对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析和高效液相色谱分析。结果显示：大豆蛋白酶解物经Sephadex G-25分离后得到了六个肽片段，其中平均链长为4，即含有2-6个氨基酸残基的大豆肽SP4具有最强的抗氧化活性，并发现它与VE具有良好的抗氧化协同作用；肽SP4进一步用RP-HPLC分离得到3个肽峰；氨基酸组成分析表明其富含亮氨酸和缬氨酸，摩尔分数分别为21.72％和11.24％。 2．大豆抗氧化肽的体外抗氧化研究 研究了大豆肽清除自由基的作用以及对小鼠红细胞自氧化溶血，肝组织匀浆和肝线粒体中丙二醛含量及线粒体肿胀度的影响。结果显示：在羟自由基和超氧阴离子自由基体系中，大豆肽各分离组分均表现出一定的抑制自由基产生的能力，其中SP4的抑制自由基产生的作用最强，10mg／mL SP4对羟自由基和超氧阴离子自由基的的抑制率分别为80.13％和72.44％，说明平均肽链长度为4的大豆肽SP4具有良好的抗氧化活性。 大豆肽SP4能显著减少红细胞自氧化溶血的发生，当肽SP4浓度为2mg／mL时，抑制率最大，为49.04％：对小鼠肝组织匀浆在温浴过程中自发产生的丙二醛有一定的