荔枝多糖的提取、分离纯化及抗氧化性研究

荔枝是无患子科荔枝属植物,原产于中国。它既是一种色、香、味俱佳的食品,又是名贵的补品,有食、疗两用之功。近年来,荔枝中的一些活性物质已经引起了人们的关注,并做了一些研究。研究发现荔枝中含有大量功能性成分,如花色苷、酚酸、多糖、原花色素以及其它活性成分。荔枝果核或果皮的萃取物具有抗氧化、抗炎症、抗诱变、预防糖尿病、降血脂以及其它生理功能。但目前对荔枝果肉中的活性物质包括荔枝多糖的研究少见报道。本文研究了荔枝果肉多糖提取的技术条件,对荔枝粗多糖进行了分离纯化研究,并对其抗氧化的活性进行了评价,为今后荔枝多糖更深入的研究与开发奠定了基础。研究结果如下: 1.建立了以苯酚-硫酸法测定荔枝多糖含量的测定方法,并对黑叶等几种常见的荔枝品种果肉中的多糖含量和换算因子进行了测定比较。结果表明,荔枝品种不同,多糖的换算因子和含量也随之各异,黑叶荔枝最适合提取荔枝多糖。 2.应用微波技术提取荔枝多糖,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法对荔枝多糖提取工艺进行优化,其最优工艺参数为:微波时间10min、微波功率640W、水料比8,荔枝粗多糖的产率为6.17%,其多糖含量为60.1%。微波浸提时,粗多糖产率和多糖含量均比传统热水浸提时高。综合考虑时间和能耗等因素,采用微波提取较好。 3.分别采用Sevag法、三氯乙酸(TCA)-Sevag法、木瓜蛋白酶-Sevag法,对粗多糖中的蛋白质进行脱除。结果表明,木瓜蛋白酶-Sevag法效果较好。经1%木瓜蛋白酶处理后,再经过3次Sevag法处理,蛋白质脱除率为83.94%,多糖损失率为24.56%。 4.脱蛋白后的多糖采用大孔树脂进行脱色,采用HPD-100树脂,30℃下吸附4h,树脂用量为16g/100mL时,对荔枝多糖的脱色效果最好,且该树脂经再生后脱色效果良好,可重复利用。 经脱蛋白、脱色、透析后的多糖,再经过DEAE-52纤维柱层析,得到经纸层析、冻融试验、紫外光谱鉴定为均一性的荔枝多糖组分。紫外光谱结果表明该多糖组分不含核酸和蛋白质等杂质。 5.采用普鲁士兰法测定荔枝多糖的还原能力结果表明,在所测定的浓度范围内,荔枝多糖的还原能力随着浓度的增加而增强。体外动物试验表明,荔枝多糖可抑制氧化损伤、保护红细胞膜,同时可抑制脂质过氧化物MDA的生成,两种抑制作用均具有一定的量效关系。