元气与衰老关系的探讨及大补元煎延缓线虫衰老作用的研究

目的:在中医理论体系中,中医元气理论占有重要位置。对元气的论述可以追溯到《内经》和《难经》。在古代,许多养生学家和医家在养生或治病中都意识到元气的作用。随着现在医疗的发展以及人民生活水平提高,人们“治未病”思想得到提高,日益注重保养身体,以求提高生活质量。本论文结合课题组前期的研究基础,以延缓衰老这一亘古不变的话题为切入点,从各个方面总结中医元气相关理论与衰老关系,并对相关论述进行总结与归纳,进一步探析培补元气及其方药延缓衰老的作用。以秀丽隐杆线虫为模式生物,观察了大补元煎复方延缓线虫衰老的效果并探讨其作用机制。目的在于更深入的挖掘中医元气理论的内涵,理论指导实践,为后面大补元煎延缓衰老应用研究提供理论和实践依据。方法:1、理论探讨:中医关于元气的论述具有十分鲜明的时代特色,是广大劳动人民几千年智慧的结晶,其理论含义包含十分广泛,并且现代临床运用也取得了许多研究成果。本文分析整理有关中医元气的古今文献,归纳中医对元气基本概念、理论内涵、功能等内容的认识,探讨元气与人体衰老相关性,阐释元气损伤与衰老的关系。以希望在反复的探索、运用和积累之间不断挖掘元气的作用。2、实验研究:本文以近几年衰老研究领域中炙手可热的秀丽线虫为模式生物。将大补元煎分为多个不同剂量组,研究其是否具有延长线虫寿命的作用及其延长线虫寿命作用的最佳有效剂量,同时研究药物对线虫生殖力的影响以及在应激条件下对线虫寿命的影响。药物效果明显,下一步收集相关基因,运用现代基因检测技术PCR进行检测,以此来判断大补元煎延缓线虫衰老的可能机制。结果:与空白组相比,大补元煎高、中剂量组能明显延长秀丽隐杆线虫平均寿命和最大寿命,尤以高剂量组效果最为显著(p<0.05,p<0.01),低剂量组对秀丽隐杆线虫寿命无明显影响(p>0.05)。对所有秀丽隐杆线虫全程存活情况做生存曲线,结果显示大补元煎高、中剂量组线虫生长曲线明显右移;生殖实验中,大补元煎药物组总子代数目虽然高于正常对照组但并无统计学差异(p>0.05),药物组与空白组生殖高峰期(第2、3天)无明显差异,实验表明大补元煎对秀丽隐杆线虫的生殖能力无损害(p>0.05);氧化应激测试中,空白组线虫在4～6小时期间大部分死亡,而大补元煎高剂量组线虫死亡高峰期在7～8h。制图表发现线虫生存曲线明显右移(p<0.01);热应激测试中,空白组线虫在4～6h期间出现大量死亡,而大补元煎高剂量组线虫此时仍大部分存活,图表显示大补元煎高剂量组线虫生存曲线明显右移(p<0.01);PCR检测,最后以2-△△CT值表示各基因在线虫体内的相对表达水平,经检测分析,氧化应激实验中,与对照组比较,用药组daf-16,hsp-16.2,sod-3基因表达上调(P<0.05,P<0.01),尤其hsp-16.2基因表达显著提高(P<0.01)。而在热应激实验中,仅hsp-16.2基因表达上调。以此推测,大补元煎延缓线虫衰老与其能提高线虫抗压力应激、抗损伤能力有关。结论:1、中医元气理论对抗衰老研究具有重要指导意义。2、大补元煎能够延缓线虫衰老。3、大补元煎延缓线虫衰老可能与其能提高线虫应激能力有关。